氯苯那敏含量测定的方法学的研究.docVIP

氯苯那敏含量测定的方法学的研究 　　摘要：本文研究的目的是通过对氯苯那敏含量测定方法的专属性、线性、稳定性、回收率、精密度、范围等实验，证明其含量测定方法适应检测要求，能为氯苯那敏含量测定提供可靠的检测方法，并对马来酸氯苯那敏的工艺合成配比起到指导作用。 　　关键词：氯苯那敏;方法学;含量测定;专属性;线性 　　【中图分类号】R927【文献标识码】A【文章编号】1672-3783(2012)04-0007-01 　　 　　1 检验方法 　　HPLC法：流动相：水：乙腈：甲醇：四氢呋喃（1375：800：200：125）对照溶液的制备：精密称取工作对照品（马来酸氯苯那敏）约0.30g，加流动相稀释至25ml，精密取1.0ml，置25ml的量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。 　　样品溶液的制备：精密称取氯苯那敏样品约0.20g，加甲醇溶解并稀释至25ml，精密吸取1.0ml，置25ml的量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。分别取对照品溶液与样品溶液20μl注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法计算即得。 　　色谱条件：检测器：紫外检测器检测波长：254nm 　　色谱柱：C18，25cm，5μm 流速：1.5ml/min 　　2 分析方法的验证 　　2.1 专属性试验:检验方法HPLC法：取氯苯那敏样品，按不同的色谱分离模式：反相色谱与离子交换色谱分别进行试验。 　　（1）反相色谱分离：按本验证方案中验证方法与操作中的检验方法进行检验。 　　（2）离子交换色谱分离： 　　色谱条件：检测器：紫外检测器；检测波长：220nm； 　　色谱柱：离子交换柱柱长：25cm； 　　流速：0.8ml/min； 　　流动相：乙腈：0.075mol/L磷酸氢二钠(用H3PO4调PH=4.0)=35∶65 　　对照溶液的制备： 　　精密称取工作对照品（马来酸氯苯那敏）约0.30g，加乙腈稀释至25ml，精密吸取1.0ml，置25ml的量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，即得。 　　样品溶液的制备： 　　精密称取氯苯那敏样品 约0.20g，加乙腈稀释至25ml，精密吸取1.0ml，置25ml的量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，即得。 　　测定：取对照品溶液20μl、样品溶液20μl分别注入液相色谱仪，记录色谱图。量取峰面积值，按外标法计算。两种检测方法结果相对偏差≤0.5%。 　　测定结果见表1： 　　表1 　　色谱分离模式样品名称批号结果（%）相对偏差（%） 反相色谱柱检测氯苯那敏Z-03-080405-0196.82 　　0.07% 离子交换色谱柱检测氯苯那敏Z-03-080405-0196.68 　　2.2 线性回归试验:检验方法：HPLC法：精密称取工作对照品0.30g，置100ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。分别精密吸取对照品贮备液0.5ml、1.0ml、2.0ml、4.0ml、6.0ml分别置25ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即分别得5个对照品溶液。分别取对照品溶液20μl，注入液相色谱仪中，测定色谱峰面积，以进样量为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，求出线性方程及R值。线性回归应呈明显的线性，R值≥0.999。 　　测定结果见表2。 　　表2 线性范围试验结果 　　进样量（μg）1.20122.40244.80489.609614.4144 色谱峰面积6260341222685244324848464987125753 　　2.3 稳定性试验：检验方法：HPLC法：取氯苯那敏样品约0.20g，加甲醇溶解并稀释至25ml，精密吸取1.0ml，置25ml的量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。精密量取同一供试品溶液20μl，按0、2、4、6、8小时时间间隔分别注入高效液相色谱仪，记录色谱峰面积，根据5次峰面积计算其相对标准偏差（RSD）。峰面积相对标准偏差RSD≤2.0%。 　　测定结果见表3。 　　2.4 精密度试验 　　（1）重复性：检验方法：HPLC法：精密称取工作对照品（马来酸氯苯那敏）约0.30g，加流动相溶解并稀释至25ml，精密吸取1.0ml，置25ml的量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。另取氯苯那敏样品约0.20g，分别称取6份，分别加甲醇稀释至25ml，精密吸取1.0ml，置25ml的量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得6份供试品溶液。取对照溶液20μl、供试品溶液20μl分别注入高效液相色谱仪，记录色谱峰面积，根据峰面积计算供试品含量（%）及样品含量的相对标准偏差（RSD）。其相对标准偏差（RSD）≤2%。 　　测定结果见表4。 　　（2）中间精密度：本方案为考察随机变动因素对精密度的影响