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狂犬病口服疫苗的研究进展 　　摘要：狂犬病是一种重要人畜共患病。防制狂犬病的最佳方法是疫苗免疫，而口服是免疫的最佳途径。现口服疫苗的研制取得了许多成果，本文就狂犬病口服狂犬疫苗的研究进展进行了综述。 　　关键词：狂犬病；口服；疫苗 　　狂犬病（Rabies）是有狂犬病病毒（Rabies virus，RV）引起的一种危害人类健康的最古老的疾病。狂犬病流行广，病毒可感染几乎所有温血动物，是一种危害严重的人兽共患病。据世界卫生组织（WHO）报道，每年至少有50万人进行暴露后疫苗免疫，每年世界范围内病毒感染导致全球有大约5.5万人死于狂犬病，其中大部分发生在发展中国家。该病死亡率100%，目前尚未能有效控制。狂犬病是一种可以用疫苗进行预防的疾病，犬是本病主要传染源，在拉美通过免疫犬使得人和犬狂犬病感染率得到了显著下降，因此通过对犬进行免疫的方法可以更好的控制狂犬病。调查表明，我国犬免疫率不足，无法形成免疫屏障，口服疫苗的方式不同于传统注射的免疫方式，更为方便，便于扩大免疫覆盖率，是简便有效的方式。本文就狂犬病口服疫苗的研究现状综述如下。 　　1 狂犬病病毒疫苗毒株的研究现状 　　1962年美国科学家首次将狂犬病弱毒疫苗通过胃管导入狐狸的胃中，没有免疫成功，美国CDC于1970年狂犬病弱毒疫苗对狐狸进行口服免疫试验，并比较了CVS、LEP、HEP、ERA株的免疫效果，试验一年后在实验室获得成功，结果表明ERA株具有最好的口服免疫原性，为以后口服疫苗的开发打下了基础。 　　ERA株源于SAD株，SAD株经瑞士科学家在BHK-21细胞上适应后变为SAD Bern株和SADswiss株；德国科学家通过BHK21细胞克隆研制出SAD突变株SAD B19。然而，SADBem株和SAD B19株对成年野生啮齿动物、犬和部分野生动物有一定毒力，所以科学家又用单克隆抗体对SAD株进行克隆，选育出SAG1株，该毒株为双缺失株，即病毒糖蛋白的第Ⅲ位点和第Ⅱ位点发生突变，失去了对幼犬及六种成年啮齿类动物的毒力。 　　SAG2株是由SADBem株选育而来的。SADB19、SAD Bern和SAG2是目前欧洲用作口服疫苗的毒株。而在美国和加拿大则主要是使用重组牛痘病毒和重组人腺病毒表达的狂犬病毒ERA株糖蛋白，即V-RG和ONRAB。 　　另外还有CTN-1株，CTN-1株是中国科学家用狂犬病街毒经鼠脑传代后成为固定毒，又经二倍体细胞传代得到的二倍体适应株CTN-1株，用该株制备口服疫苗一次免疫可提高长达15个月的保护力。 　　2 狂犬病口服疫苗的研究现状在得到合适的毒株后，人们开始寻找简单方便的免疫方式，口服无疑是最佳的选择。于是学者们不断尝试研制狂犬病口服疫苗，到目前为止取得了许多的成果。 　　郑海发等将CTN-1株经Vero细胞传15代后给犬口服，30d阳转率为l00%，又用10倍剂量给犬口服，取犬脑和唾液在BHK21细胞盲传2代，同时小鼠脑内盲传，进行病毒分离，均为阴性，结果表明该口服疫苗具有较好的安全性和口服免疫原性。 　　另外，为了延长疫苗对动物机体的刺激时间，缓释材料也被尝试用在疫苗的研制过程中。孙加燕以狂犬病病毒鸡胚低代毒（Flury-Iep）为模型，海藻酸钠为缓释材料制备缓释微丸，研制Flury株的口服疫苗，并进行了口服疫苗的安全性、有效性和无菌性研究。结果表明该狂犬病口服疫苗，收到了良好的免疫效果，这就为动物口服疫苗的研究提供了一个新的研究方向。 　　狂犬病病毒为人兽共患病病毒，不仅要考虑免疫动物的安全性还要考虑对人和环境的安全性，因此狂犬病病毒弱毒则成为活疫苗的最佳选择。Darkaoui S等利用SAG2株制备了口服疫苗，根据WHO推荐的方法分别对农村犬、流浪犬和野生犬进行了口服疫苗的免疫，结果显示三种方式分别有77%、46.7%和73%的诱饵被采食。这表明诱饵对犬有良好的适口性，口服疫苗的方式是可行的。 　　众所周知，疫苗的保护率是评价一个疫苗的重要指标，所以在提高保护率方面学者们也做了很大努力。Yang DK等通过反向遗传系统构建了一株重组病毒（ERAG3G株），通过口服免疫小鼠研究其效果，并通过肌肉注射免疫猫来观察其安全性。结果全部小鼠均产生对狂犬病毒重组病毒的保护力，猫免疫后28d中和抗体效价高达2.62～23.9IU/mL，为口服重组疫苗的研制提供了参考。说明构建的重组病毒可以为动物提供较好的保护。 　　要达到免疫的作用，主要是要机体产生针对该病毒的中和抗体，而中和抗体的产生并非一定要全病毒的存在，只要能刺激机体产生中和抗体的抗原存在即可，因此可以利用分子生物学的手段得到这些抗原，从而避免使用全病毒，这样安全性便可得到保障。现代分子生物技术的发展为疫苗的研制提供了强有力的工具，使得人们可以按照意愿在病