基于磁性纳米粒子抗体复合物分离34细胞的新技术.docVIP

基于磁性纳米粒子抗体复合物分离CD34细胞的新技术 ：赵丽娜，沈鹤柏，陈伟，朱龙章 】本研宄合成磁性纳米粒子抗体复合物 (magneticnanopartides antibody, MNPs Ab)，建 立用此复合物从跻带血中分离CD34细胞的方法并评价其效 果。利用磁性纳米粒子抗体复合物的超顺磁性和对CD34 细胞的识别及结合功能，在外加磁场的作用下，分离脐血 中的CD34细胞；用扫描电子显微镜(scanningel ectronmicr oscopy, SEM )观察分离后CD34细胞的形态变 化；用流式细胞仪(flowc ytometer, F CM)分析分离效 率；用液体培养和集落培养鉴定CD34细胞增殖能力和多向 分化能力。结果显示：利用磁性纳米粒子抗体复合物可 以快速、高效地将⑶34细胞从脐血中分选出来，而且分离 后的C D34细胞仍然保持正常形态、高度的增殖能力和多向 分化能力。结论：成功地研制了磁性纳米粒子抗体复合 物分离CD34细胞技术，该技术能高效、快速地分离CD34 细胞。 关键词】磁性纳米粒子跻血CD34细胞 ANewMetho dforlsolat ingCD34Cel IsBasedonC omplexofMa gneticNano particlesa ndAntibody Abstract Thepurpose ofthisstud ywastosynt hesizethec omplexofma gneticnano particlesa. ndantibody ，andtoappl ythemtoiso latetheCD3 4cellsfrom umbilicalc ordblood,t hentoevalu ateitssepa rationeffi ciency.The complexofm agneticnan oparticles andantibod ywasusedto separateCD 34cellsfro mumbilical cordbloodi ntheouterm agneticfie ldbecauseo fitssuperp aramagneti sm, specifi cidentific ationandfu nctionofco mbinationw ithCD34cel Is.Scannin gelectronm icroscopyw asusedtoob servethemo rphologyof theseparat edCD34cell s.FlowCyto meterwasap pliedtoeva luatetheso rtingeffic iencyofmag neticnanop articles,1 iquidcultu reandcolon yculturewe retakentoa ssayprolif erationand different! ationcapac ityofthese paratedCD3 4cells.The resultssho wedthatthe CD34cellsf romumbilic alcordbloo dwereisola tedfastand effectivel ybythecomp lexofmagne ticnanopar ticlesandm onoclonala ntibody. Mo reover,the isolatedCD 34cellssti llmaintain editsnorma lmorpholog y，highlypr oliferativ eanddiffer entiativec apacity. It isconclude dthattheco mplexofmag neticnanop articlesan dmonoclona lantibodyh asbeensucc essfullysy nthesizeda nddevelope dasatechni quewhichef ficientlya ndquicklyi solatesCD3 4cellsfrom umbilicalc ordblood. Keywordsm agneticnan oparticle ； umbilicalc ordblood； C D34cell 造血干细胞是具有高度自我更新能力和多向分化潜能 的造血前体细胞。现己知道，造血干细胞不是单一的细胞 群体，这些细胞不仅含量极低，而且没有特定的、稳定的 表型［1］，因此分离造血干细胞非常困难。最初分离富集 细胞的方法是依据细胞的浮力密度等物理学特性，采用速 度离心沉淀、密度梯度离心以及逆流离心淘洗等技术分离， 分