蒜瓣浸出液抗柔嫩艾美耳球虫效果的研究.docVIP

蒜瓣浸出液抗柔嫩艾美耳球虫效果的研究 　　摘要：为了考察大蒜浸出液在抗鸡球虫临床上的应用。试验设Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组，第Ⅰ组：卵囊分别投入50%、20%、10%的蒜瓣浸出液、2.5%重铬酸钾液中，恒温培养24、48、72 h后计算卵囊孢子化率。第Ⅱ、Ⅲ组：分别以50%蒜瓣浸出液抑杀的未孢子化、孢子化卵囊，恒温培养48 h洗净感染1×105个/只卵囊；第Ⅳ组：感染1×105个/只孢子化卵囊，以20% 的蒜瓣浸出液作为驱虫中药替代饮水；第Ⅴ组：感染1×105个/只孢子化卵囊后不给药；第Ⅵ组：不感染不给药。结果表明，50%、20%浓度蒜瓣浸出液于24、48、72 h后卵囊孢子化率与对照组差异均显著（P0.05）；以第Ⅱ组雏鸡的平均增重及相对增重率最高，组间差异不显著，与感染对照组（Ⅴ）差异显著；第Ⅲ组平均OPG数仅次于感染对照组（Ⅴ），远高于Ⅱ、Ⅳ组差异显著；第Ⅱ、Ⅳ组卵囊比值在25%～50%区间，卵囊值均为10；第Ⅲ组卵囊比值在75%～100%区间，卵囊值为40；第Ⅲ、Ⅴ组部分鸡只出现血便；第Ⅲ组病变值（11.7）仅次于第Ⅴ组（23.3），第Ⅲ、Ⅳ组间差异显著；在第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ3组中，ACI以第Ⅱ组（173.95）为最高，第Ⅳ组次之，2组均判为中等效果。第Ⅲ组ACI为117.55，小于120判为无效。蒜瓣浸出液对体外抑杀未孢子化卵囊感染、体内阻断球虫发育效果较好。 　　关键词：蒜瓣；抗柔嫩艾美耳球虫；效果 　　中图分类号：S852.72+3 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2015）01-0134-03 　　随着养鸡业的不断发展，抗鸡球虫病的药物效果、药物抗药性、药物残留或鸡产品食用安全越来越受到关注[1，2]。中草药具有抑杀球虫和毒副作用小、增强机体免疫功能及促生长等优点，尤其是鸡球虫对其不易产生耐药性，有着广阔的前景[3]。刘星等[4]用20种中草药体外抑杀兔肠球虫及肝球虫卵囊，结果表明，侧柏叶、白头翁、大蒜、农吉利、苦参、鱼腥草、洋葱、皂角和穿心莲等药物有较高的抑杀作用；李文超等[5]用白头翁汤复方及组分抑杀柔嫩艾美耳球虫卵囊，白头翁及其总皂苷对球虫卵囊的孢子化抑制效果较好。本研究用大蒜浸出液进行抗鸡球虫效果试验，以期为大蒜浸出液抗鸡球虫在临床应用方面提供依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 虫株及动物 　　柔嫩艾美耳（E.tenella）虫株由本教研室提供；1日龄蛋鸡公雏购于南昌熊坊孵化场；干制蒜瓣购于农贸市场。 　　1.2 溶液的制备 　　饱和食盐水、2.5%重铬酸钾液：称取2 280 g食盐和2.5 g重铬酸钾，分别加入6 000 mL开水和100 mL清水中，溶解过滤。 　　蒜瓣浸出液：称取干制蒜瓣50 g加入100 mL清水，豆浆机打碎、过滤，取50、20、10 mL滤液，分别加50、80、90 mL蒸馏水，配制成50%、20%、10%的浸出液。 　　1.3 虫株复壮、增殖 　　取E.tenella虫株卵囊液，对水离心2遍洗去重铬酸钾液，经口感染公雏，6 d后检查粪便卵囊，当卵囊大量排出时，守候收集雏鸡刚排出的新鲜粪便于盛有适量4 ℃冷水的500 mL烧杯中，4 ℃冰箱保存。 　　1.4 卵囊分离收集 　　粪便加4 ℃冷水拌匀，过滤，2 000 r/min离心5 min，倾上清液留沉淀，加4 ℃ 10 mL饱和食盐水再2 000 r/min 离心5 min，留上清液弃沉淀物，加冷水离心，倾上清液留沉淀液，重复2～3遍。 　　1.5 试验分组 　　试验设体外抑杀未孢子化卵囊发育组（Ⅰ组）、体外抑杀未孢子化卵囊感染组（Ⅱ组）、体外抑杀孢子化卵囊感染组（Ⅲ组）、体内阻断球虫发育组（Ⅳ组）、感染对照组（Ⅴ组）、空白对照组（Ⅵ组）。第Ⅰ组：卵囊分别投入50%、20%、10%的蒜瓣浸出液、2.5%重铬酸钾液中，每份3个重复，恒温培养24、48、72 h后计算卵囊孢子化率。第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组，雏鸡10日龄时随机分组（6只/组），饲养于消毒后的不锈钢笼内，食用不含药物或鸡球虫污染的饲料和水。25日龄时空腹称重，第Ⅱ、Ⅲ组：分别以50%蒜瓣浸出液抑杀的未孢子化、孢子化卵囊，恒温培养48 h后洗净感染1×105个/只卵囊；第Ⅳ组：感染1×105个/只孢子化卵囊，以20%的蒜瓣浸出液作为驱虫中药替代饮水；第Ⅴ组：感染1×105个/只孢子化卵囊后不给药；第Ⅵ组：不感染不给药。分组后每天观察雏鸡的精神、饮食和粪便状况，记录发病鸡或死亡雏鸡数，对死亡雏鸡解剖确定是否死于球虫病；感染第5天起，每天检查收集Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组雏鸡粪便，统计血便堆数，计算OPG；感染后第八天各组雏鸡空腹称重并剖检，观察鸡只盲肠病变并给分。 　　1.6 卵囊的计算 　　1.6.1 卵囊孢子化率 卵囊培养24