葡萄籽中原花青素提取工艺的研究.docVIP

葡萄籽中原花青素提取工艺的研究 　　摘要:原花青素具有良好的清除自由基和抗氧化的活性,有很大的开发应用价值。以葡萄籽为原料,研究了溶液的pH值、提取剂浓度及提取时间对提取原花青素的影响,并且用超声波法和索氏提取法进行原花青素提取率的研究。结果表明,从葡萄籽中提取原花青素的最佳条件为:在20~25℃的条件下,pH值为4,料液比(g∶mL)为1∶7,60%的乙醇作为提取剂,提取2h,提取率可高达4.21%;超声波法及索氏提取法均可以增加原花青素的提取率,提取率最高可达4.60%。 　　关键词:葡萄籽;原花青素;超声波法;索氏提取法 　　 　　中图分类号:TS202.3 　　文献标识码:A 　　文章编号:1674-9944(2010)08-0197-03 　　 　　1 引言 　　原花青素(?Oligomeric Proantho Cyanidins,OPC?),是目前国际上公认的清除人体内自由基最有效的天然抗氧化剂,是最强效的自由基清除剂之一,具有非常强的体内活性。原花青素是植物界广泛存在的一大类多酚化合物的总称,是由不同含量的儿茶素或表儿茶素结合而成。原花青素分子中含有多个苯环和醚键,具有油溶性;同时含有大量的羟基连接在分子骨架上,具有较好的水溶性。原花青素的结构通式如图1所示。 　　 　　图1 原花青素的结构通式(n为0~10) 　　 　　原花青素的提取原料主要是葡萄籽或松树皮,由于松树皮受到资源的限制,而葡萄籽一般为葡萄酒厂的废料,占整粒葡萄的5%~6%,每年我国生产葡萄酒后的废渣中就有400~600万的葡萄籽。因此,研究葡萄籽中的原花青素的提取工艺不仅具有很大的科学价值,还会带来巨大的经济效益。原花青素通常以结合态与蛋白质、纤维素结合在一起,一般不宜提取,通常选用有机溶液,但是由于纯有机溶液的渗透性较差,一般不单独使用。本文初步探索有关葡萄籽中原花青素的溶液提取法,以葡萄籽为原料,依据溶解度差异,采用乙醇水溶液作为提取剂提取原花青素,并在提取过程中采用超声波法以及索氏提取法,来提高原花青素的提取率(提取率%=提取得到的原花青素质量/投料的葡萄籽质量×100%)。 　　2材料与方法 　　2.1试验药品 　　石油醚,天津市化学试剂厂,分析纯;乙醇,天津市大茂化学试剂厂,分析纯;乙酸,天津市大茂化学试剂厂,分析纯;AB-8树脂,安徽三星树脂科技有限公司,分析纯。 　　2.2实验仪器 　　定时电动搅拌器,JJ-1型,江苏金坛市金城国盛实验仪器厂;离心分离机,800B,上海安亭科学仪器厂;循环水式多用真空泵,SHZ-CD型,河南巩义市英峪予华仪器厂;真空干燥箱,DZF-6020,河南巩义市英峪予华仪器厂;红外光谱仪,FI-IR4800S,岛津研究所;数控超声波清洗器,KQ250DB,河南巩义市英峪予华仪器厂。 　　2.3 原花青素的提取过程 　　研磨,用石油醚浸泡24h 　　抽滤,取滤 　　加入乙醇水溶液,搅拌 　　离心分离取上层清液 　　AB-8树脂吸附提纯 　　减压蒸馏 　　真空干燥 　　产物 　　 　　图2 原花青素的提取工艺流程 　　如图2,把风干的葡萄籽研碎,用20目筛筛去大颗粒。准确称取10.0g研碎的葡萄籽,加入30mL石油醚,常温浸泡24h。抽滤,脱去油脂。将滤饼放入烧瓶中,加入乙醇水溶液,在20~25℃温度下提取2h(过程中可用超声波法或索氏提取法)。用离心分离机分离混浊液。取上层清液用AB-8树脂湿法装柱进行吸附。将液体进行减压蒸馏,产物真空干燥24h,得红褐色粉末,即为原花青素。 　　3结果与讨论 　　3.1原花青素的结构表征 　　图3为原花青素的红外光谱图。λ在3289~3417cm??-1?处有强而宽的羟基伸缩振动吸收峰,1457~1750cm??-1?处为苯环C-C骨架伸缩振动,表明提取物中含有大量带有羟基的苯环,为多酚类化合物。与原花青素的标准红外光谱图对照,两幅谱图相近,表明所得产物为原花青素。 　　 　　图3 实验中得到的原花青素的红外光谱(IR) 　　 　　3.2pH值对提取率的影响 　　在室温下,称取10.0g葡萄籽,料液比(g:mL)为1∶7,浓度为60%的乙醇水溶液作为提取剂,提取2h,测定不同pH值的溶液对提取率的影响,如图4所示。 　　 　　图4 不同pH值的溶液对提取率的影响 　　 　　由图4可知,在提取过程中加入适量的乙酸可以破坏蛋白质、多糖、纤维素与原花青素的结合,从而提高原花青素的提取率和提取速度。而过度酸化,会造成原花青素酸解,会导致原花青素提取率下降。 　　3.3乙醇水溶液浓度对提取率的影响 　　在室温下,称取10.0g葡萄籽,料液比为1∶7, 调节pH值为4,提取2h,改变乙醇水溶液浓度