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西瓜杂交种子纯度鉴定的方法的研究进展 　　摘要：西瓜杂交种子纯度鉴定一直是个技术难题，是杂交种子生产经营的重要环节。文章综述了利用传统的田间种植鉴定西瓜杂交种子纯度的方法，以及电泳技术和分子标记技术等实验室技术手段在西瓜杂交种子纯度快速鉴定应用方面的研究进展及存在的问题。 　　关键词：西瓜；杂交种子；纯度鉴定 　　 　　西瓜是世界十大水果之一，我国西瓜栽培面积及产量均居世界首位，而优质的西瓜种子特别是杂交良种是各种类型西瓜栽培成功的前提。自20世纪80年代西瓜杂交一代品种在我国普及推广以来，栽培面积迅速扩大，但在人工制种过程中，由于隔离不严或人工去雄不及时、不彻底等原因而导致杂交一代种子不纯，因而给生产造成了损失。所以，加强对西瓜杂交一代种子纯度快速鉴定方法的研究，已成为西瓜良种生产中的一个重要环节。 　　当前种子生产和经营部门对西瓜种子纯度的检测主要靠田间种植的方法。近年来，随着生化及分子技术的发展以及在作物品种鉴定上的应用，国内外一些科研单位开展了利用蛋白质电泳技术以及DNA分子标记技术在西瓜杂交种子鉴定上的应用研究，旨在探索一种准确、经济、快速的实验室鉴定方法。 　　 　　1　形态检验法在西瓜种子检测上的应用 　　 　　传统的种子鉴定主要采用种子形态鉴定、苗期标记形态鉴定、子房形态鉴定及果实形态鉴定等是目前西瓜品种纯度鉴定的主要方法。 　　 　　　1.1种子形态鉴定法 　　除三倍体无籽西瓜外，一般双亲二倍体杂交一代西瓜种子形态与母本相同或相近，可根据母本种子的大小、色泽、形状及种子表面裂纹、麻点的有无及多少判断。三倍体无籽西瓜可从种子形态上进行纯度鉴定，其母本为四倍体，种子种胚发育好，种子饱满，种面较凸：三倍体杂交种子种胚发育不好，种子较瘪，种面平或凹入。该鉴定法在收种后可在室内鉴定，鉴定周期最短，成本最低，一般只有三倍体无籽西瓜品种种子适于该法鉴定，但无法将母本相同父本不同的2个无籽西瓜品种区别开。 　　 　　1.2苗期形态鉴定法 　　指从出苗至开花前的发育阶段进行形态鉴定。进行苗期鉴定的品种，与母本相比必须有一些明显的标记性状和特征。如叶形(全缘叶、缺裂叶等)，以全缘叶作母本、缺裂叶作父本的，表现缺裂叶的为杂交株，全缘叶的为假杂株，在幼苗3～4片叶时即能准确识别，鉴定周期为30～40d，利用该性状育成的西瓜品种有津丰1号等：叶片后绿性状，后绿与一般正常绿幼苗或植株都有明显的区别，苗期鉴定以子叶出土到幼苗长出第1片叶最适宜，鉴别期为7～10d，应用的西瓜品种有郑果5506等。此外，该鉴定方法可利用的标记性状还有幼果皮色、蔓形(短蔓、紧凑等)、叶色(叶片黄斑等)、花蕾形状、叶蔓光滑无毛、蔓无分枝等。但该鉴定法技术难度大，不易掌握。 　　 　　1.3子房形态鉴定法 　　该法利用瓜胎或幼瓜等标记性状鉴定，从播种到瓜胎显现为1个鉴定周期，需40-50d，是目前西瓜杂交种鉴定最常用的方法。不同类型子房的西瓜杂交组合其F1代的子房形状有区别，一般圆×长的杂交组合如西农8号类型，F1代子房表现短椭圆形，圆子房为假杂株。长×圆的组合如丰收2号类型，F1代子房为短椭圆形、中部肥大，假杂株为长椭圆形。圆×圆的组合如京欣1号类型，F1代子房为高圆形，假杂株为圆形。该鉴定法优点是鉴定周期较短，占地较少，鉴定成本较低：缺点是不能看出果形或皮色与杂交父本相似的其他自由交杂种植株，对鉴定地域的积温条件要求较高。 　　 　　1.4果实鉴定法 　　果实膨大后可从果面特征及剖面进行鉴定。果面特征可从颜色深浅，外观形状，网纹或花皮，条带的宽与窄、规则与锯齿，有无果粉等特征进行区分；果实成熟后剖瓤看籽，根据种子大小、形状、颜色以及瓜瓤颜色鉴别其纯度：无籽西瓜还可以看是否有种子以及空壳、秕籽的多少进行鉴别。该法是西瓜品种特征最明显、结果最可靠的鉴定方法，但周期长，占地多，费用大，对鉴定地域的积温条件要求高。多用于仲裁鉴定、亲本鉴定以及杂交种与双亲外观差别不明显的鉴定。 　　 　　2　蛋白质电泳技术在西瓜种子检测上的应用 　　 　　蛋白质电泳主要是利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，通过分析作为基因产物的蛋白质和同工酶来鉴定品种纯度。该法包括同工酶电泳法和种子贮藏蛋白质电泳法，2种方法在西瓜种子纯度鉴定上都有报道。 　　 　　2.1同工酶电泳法鉴定 　　黄永红等㈣对6个西瓜杂交组合进行了过氧化物同工酶纯度鉴定研究。结果表明，利用苗期过氧化物同工酶可以进行西瓜杂交种真实性与纯度鉴定。陈清华等对无籽西瓜组合G1、杂交西瓜组合G2及其双亲不同生长期、不同部位的过氧化物酶、酯酶同工酶进行研究的结果表明，G1母本胚根、第1真叶的过氧化物酶同工酶，胚芽、子叶及第2、第3真叶的酯酶同工酶酶谱明显异于子代：G2母本的胚芽、子叶及