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肾石通颗粒HPLC特征图谱的研究 　　摘要：目的 建立肾石通颗粒的高效液相色谱特征图谱。方法 采用Thermo Hypersil GOLD-C18色谱柱（4.6 mm×25.0 mm，5 μm），以乙腈-0.2%磷酸水溶液为洗脱剂进行梯度洗脱（0～20 min，5%→10%乙腈；20～40 min， 10%→12%乙腈；40～60 min，12%→14%乙腈；60～90 min，14%→20%乙腈；90～120 min，20%→28%乙腈），检测波长280 nm，流速1.0 mL/min，柱温30 ℃，分析时间120 min。结果 根据10批样品建立了肾石通颗粒的高效液相色谱特征图谱，确定了27个共有峰， 其中包含丹参、金钱草等6味药的特征峰。结论 该法灵敏度高、稳定性和重复性良好，可用于肾石通颗粒的质量控制。 　　关键词：肾石通颗粒；高效液相色谱法；特征图谱 　　DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2015.03.026 　　中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2015）03-0098-04 　　肾石通颗粒由丹参、金钱草、牛膝、王不留行、瞿麦、?q蓄、木香、鸡内金、海金沙、延胡索10味中药组成，具有清热利湿、活血止痛、化石、排石功效，主要用于治疗肾结石、肾盂结石、膀胱结石等[1]。肾石通颗粒的质量标准收载于《中华人民共和国卫生部药品标准?中药成方制剂》中，其中只有性状和检查项，对各主要成分的含量测定未作规定。 　　对于传统中成药复方制剂的质量控制，目前多采用薄层色谱法和高效液相色谱法（HPLC）对单味药活 　　基金项目：湖南省“十二五”中药学重点学科（2011ZY0018） 　　通讯作者：夏新华，E-mail：xiaxinhua001@163.com 　　性成分进行定性和定量鉴别[2-5]，不能全面反映肾石通颗粒中的化学成分及其相对含量。中药特征图谱是一种综合、可量化的质量控制手段，能够较好反映中药复杂的化学成分，已成为公认的鉴别中药和评价中药质量的有效手段，是一种良好的色谱鉴别方法[6]。目前对肾石通颗粒特征图谱的研究尚未见报道，只有对处方中单味药材特征图谱的研究[7-9]，本试验采用HPLC建立肾石通颗粒特征图谱色谱条件，并通过对照药材对色谱峰进行归属，为肾石通颗粒的质量标准提供依据。 　　1 仪器与试药 　　Agilent1100型高效液相色谱仪，YD601N型电子天平（上海恒平科学仪器有限公司），SHZ-Ⅲ型循环水式真空泵（上海亚荣生化仪器厂），KQ5200BE型数控超声清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。 　　肾石通颗粒，湖南时代阳光药业股份有限公司，批号分别S1）S2）（S3）S4）S5）S6）S7）S8）S9）（S10）。金钱草、王不留行、丹参、鸡内金、瞿麦、延胡索、木香、海金沙、?q蓄、牛膝药材均购自长沙老百姓大药房。丹酚酸B（批号111562-201212，中国食品药品检定研究院），甲醇（分析纯，天津市恒兴化学试剂制造有限公司），磷酸（色谱纯，天津市科密欧化学试剂有限公司），乙腈（色谱纯，SPECTRUM），纯净水（怡宝）。 　　2 方法与结果 　　2.1 对照品溶液的制备 　　精密称取丹酚酸B对照品14.3 mg，置于50 mL容量瓶，加75%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取其中1 mL置于5 mL容量瓶，加75%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀即得（0.057 2 mg/mL）。 　　2.2 对照药材溶液制备 　　精密称取丹参、金钱草、牛膝、王不留行、瞿麦、?q蓄、木香、鸡内金、海金沙、延胡索对照药材各1.0 g，置100 mL具塞锥形瓶中，加入75%甲醇50 mL，超声提取（功率100 W，频率53 kHz）2次，每次30 min，过滤，取续滤液，定容至100 mL，即得。 　　2.3 供试品溶液制备 　　取肾石通颗粒适量，研细，精密称定10.0 g，置100 mL具塞锥形瓶中，加入75%甲醇50 mL，超声提取（功率100 W，频率53 kHz）2次，每次30 min，过滤，取续滤液，定容至100 mL，即得。 　　2.4 色谱条件 　　Thermo Hypersil GOLD-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm， 5 μm），以乙腈-0.2%磷酸水溶液为洗脱剂进行梯度洗脱（0～20 min，5%→10%乙腈；20～40 min，10%→12%乙腈；40～60 min，12%→14%乙腈；60～90