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黑麦冬工厂化育苗关键技术的研究 　　摘要：基于消毒成功的黑麦冬无菌组培苗，对继代、壮苗、生根及培养过程中几个重要的技术环节进行了研究，结果表明：最佳增殖培养基为MS+ 6-BA 4 mg/L+NAA 0.4 mg/L；最佳壮苗培养基为MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.2 mg/L；最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.1 mg/L。增殖过程中进行小丛芽增殖，光照强度设定为800～1 300 lx，可以获得较高的增殖系数和生长量；在培养过程中制定分级标准，对组培苗进行分级，可以节省接种材料，得到一致性较好的种苗。 　　关键词：黑麦冬；组织培养；工厂化育苗 　　中图分类号： S688.404+.3文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）02-0138-03 　　收稿日期：2013-06-09 　　基金项目：珍稀树种苗木培育技术推广项目（编号：桂林科字[2011]第02号）。 　　作者简介：王华宇（1981―），男，河南南阳人，硕士，工程师，从事植物组织培养和园艺栽培学研究。E-mail：hywangsky@163.com。黑麦冬（Ophiopogon planiscapus cv. Arabicus）别名黑龙，为百合科沿阶草属多年常绿簇生草本植物，是近年来引进的新品种之一。其株高15 cm左右，叶片近黑色，狭长状，长 10～15 cm，形如韭菜。黑麦冬耐寒性、抗逆性强，是优良的地被观叶植物，在欧洲和北美园林应用较多，对种苗的需求呈现供不应求的局面，但在国内目前应用尚少。黑麦冬通常依靠分株繁殖，但由于其生长缓慢、繁殖系数极低，很难满足市场需求。目前，关于麦冬属植物离体快繁的研究较多[1-4]，但利用组培技术进行黑麦冬工厂化生产方面的技术和工艺研究尚未见报道。本研究在黑麦冬组织培养再生完整植株的工作基础上，开展了工厂化生产过程中的若干关键技术研究，形成了一套高效的黑麦冬组培苗扩繁工艺，实现了组培苗的工厂化生产。 　　1材料与方法 　　1.1材料 　　以黑麦冬茎尖诱导培养的优良组培苗为试验材料。 　　1.2工厂化生产中的若干关键技术研究 　　1.2.1培养基配方设计增殖培养和壮苗培养以MS为基本培养基，生根培养以1/2MS为基本培养基。（1） 增殖培养基：细胞分裂素6-BA和生长素NAA协同使用时，其浓度比例设为10 ∶1，具体配方如下：MS+6-BA 1 mg/L+NAA 0.1 mg/L；MS+6-BA 2 mg/L +NAA 0.2 mg/L；MS+6-BA 3 mg/L +NAA 0.3 mg/L；MS+6-BA 4 mg/L +NAA 0.4 mg/L；MS+6-BA 4 mg/L；MS+6-BA 5 mg/L +NAA 0.5 mg/L；MS+6-BA 6 mg/L +NAA 0.6 mg/L；（2） 壮苗培养基：MS；MS+6-BA 0.5 mg/L +NAA 0.05 mg/L；MS+6-BA 1 mg/L +NAA 0.1 mg/L；MS+6-BA 2 mg/L +NAA 0.2 mg/L；MS+6-BA 3 mg/L +NAA 0.3 mg/L；（3）生根培养基：1/2MS+NAA 0.05 mg/L；1/2MS+NAA 0.1 mg/L；1/2MS+IBA 0.1 mg/L；1/2MS+NAA 0.2 mg/L；1/2MS+NAA 0.1 mg/L +IBA 0.1 mg/L。 　　1.2.2培养条件除特别说明外，上述培养基均添加3%蔗糖和0.6%琼脂粉，pH值5.8～6.0。培养室温度为 （25±2） ℃，光照时间12 h/d，增殖接管光强为800～1 300 lx，生根阶段光强为2 000～3 000 lx。 　　1.2.3切割方法对增殖的影响将增殖苗按照单芽、小丛芽（2～3芽/丛，下同）切除愈伤组织、小丛芽基部愈伤保留 2/3、小丛芽基部愈伤全保留的方式切割，观察不同切割方法对增殖苗生长的影响。 　　1.2.4光照强度对组培苗生长的影响以散射光状态下（约500 lx）生长的增殖苗为对照，观察不同光强对黑麦冬生长的影响。设置光强为800～1 300 lx、1 500～2 000 lx、2 000～3 500 lx。 　　1.2.5试管苗分级标准的制定在增殖阶段，按照组培苗生长状态制定分级标准，达到一定规格的进行壮苗培养，小芽和愈伤继续增殖培养；在壮苗阶段，制定分级标准，达到一定规格的进行生根培养，小芽和愈伤继续进行增殖或壮苗培养。 　　2结果与分析 　　2.1不同激素配比对组培苗增殖的影响 　　挑选生长健壮的丛生芽，保留基部愈伤组织2/3左右，以2～3株/丛的团块转入增殖培养基，培养5周观察生长情况并进行统计。不同激素组合