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基质辅助激光分析电离 　　【摘 要】目的探究基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱仪在临床微生物鉴定中的应用，为真菌微生物的鉴定提供临床技术支持。方法选取于2015年3月到2017年2月我院临床采集的真菌作为实验标本，利用基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱仪对菌种进行鉴定，分析基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱仪对菌种鉴定的检查效果。结果300株真菌中有290株（96.67%）经鉴定后可以正确归类到种水平，6株（2%）未能给出鉴定成果，4株（1.33%）鉴定结果出现错误，且正确率与传统方法相比差异显著，具有统计学意义（P0.05）。结论基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱仪稳定性高，可重复性好，并且具有快速准确的优点，是临床鉴定微生物种类的一种快速可靠的高通量方法，可以为临床的微生物鉴定提供一定的技术支持。 　　【关键词】基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱仪；微生物鉴定；临床应用 　　真菌感染是指由于机体感染真菌而引起的一系列疾病，感染类型大致包括表面感染，皮肤感染，皮下组织感染，深部感染以及条件性感染[1-4]。?l生真菌感染的原因有很多，主要包括以下五个方面：（1）滥用抗生素：随着光谱抗生素的广泛应用，越来越多的人们选择利用抗生素来治疗细菌感染，这些抗生素在治疗感染的同时也会减少有益菌的数量，从而破坏机体菌种平衡。（2）糖皮质激素的过量使用：针对炎症患者以及皮肤病患者糖皮质激素的使用是必不可少的，然而这些药物的使用却会导致人体的免疫系统功能下降，为真菌感染创造了有利条件。（3）遗传因素：遗传因素也是机体产生真菌感染的一个重要原因，相对于正常人，这类人群由于遗传物质的差异性导致他们更容易受到真菌的侵袭。（4）免疫系统功能障碍：由于化疗或者免疫系统缺陷症等因素导致机体免疫系统功能发生障碍，从而给真菌染感染创造了一个适宜生长的环境[5-9]。因此真菌感染在临床上也越来越多见。常见的实验室真菌鉴定方法是常规传统真菌鉴定方法，这种方法操作复杂，鉴定周期较长，对于设备以及技术水平的要求较高，因此往往会造成临床诊断以及治疗的滞后性，会广大医患人员带来较大的困扰，然而随着科学技术的不断进步，基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱技术出现在人们视野之中。基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱技术是一种快速鉴定微生物种类的新技术，近年来广泛应用于医学、生物等多个领域[10]。因此本次研究通过比较传统真菌鉴定方法与基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱技术对菌种鉴定的准确率，探究基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱仪在临床微生物鉴定上的应用。 　　1 资料与方法 　　1.1 菌种来源 　　本次研究一共选取300株真菌作为研究对象，全部菌株均来自于2015年3月到2017年2月我院临床采集的真菌，质控菌种为白念珠菌ATCC14053和大肠埃希菌ATCC25922。 　　1.2 试验仪器与设备 　　法国梅里埃公司的基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱仪以及配套的数据库系统，电子显微镜，水浴锅，无菌注射器，基质液，一次性无菌试管，全自动微生物鉴定仪，真菌培养箱，离心机，移液枪等。 　　1.3 实验方法 　　对采集来的真菌标本进行分离培养，标本接种在平板上在36℃的真菌培养箱中进行培养，直到肉眼可见菌落时进行细菌种类鉴定。对所有菌种同时采用两种方法进行鉴定，分别为常规传统真菌鉴定方法以及基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱技术，对比两种结果准确率。常规真菌鉴定方法是将菌落进行革兰氏染色，同时对菌落进行镜检，通过对菌落的形态以及革兰氏染色结果进行分析。基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱法是将真菌接种到靶板上，然后再菌膜没有完全干燥之前加入α-腈基-4-羟基肉桂酸基质，等待基质和菌株混合物完全干燥后将样本放入仪器中进行分析扫描，利用数据库进行鉴定，判断菌株种类。结果结果可信程度在60.0%-99.9%之间且结果为一个是认为该结果可以接受。 　　1.4 统计学分析 　　所有数据均采用统计学软件SPSS19.0进行统计分析，计量资料采用百分比表示，进行卡方检验，P0.05表示差异具有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 真菌鉴定种类分布 　　经过鉴定，300株真菌种类分别为：热带念珠菌、白色念珠菌、阿萨斯酵母菌、烟曲霉米曲霉、宛氏拟青霉、烟草赤星病菌，详细数据见下表。 　　2.2 两种方法鉴定真菌的正确率比较 　　本次研究采用了两种真菌鉴定方法，常规鉴定组共检查300株真菌，其中正确的有156株，正确率为52.00%，100例检查错误，44例未检出；基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱技术共检查300株真菌，其中290株检查正确，正确率为96.67%， 6株（2%）未能给出鉴定成果，4株（1.33%）鉴定结果出现错误。两组检查方法正确率存在差异，基