小儿肺炎血清衣原体抗体微量免疫荧光法检测及剖析.docVIP

小儿肺炎血清衣原体抗体微量免疫荧光法检测及剖析 　　[摘要] 目的：探讨沙眼衣原体（Ctr）、肺炎衣原体(Cpn)在不同年龄阶段肺炎小儿中的感染状况。方法：运用微量免疫荧光试验检测392例各年龄组肺炎住院儿童的血清Ctr 、Cpn抗体。结果：共发现Ctr阳性44例，Cpn阳性89例。28 d组、1～11个月、1岁～2岁11个月、3～5岁11个月、6～14岁组患儿Cpn肺部现症感染率逐次增高，分别为0，1.19%，3.02%，13.74%，14.44%，中间3组每后一组均比前一组明显增高，差异有显著性（P0.05）；Ctr肺部现症感染率则随年龄递增而逐次减低，分别为9.48%，4.15%，0.25%，0，0，前三组每相邻两组差异有显著性（P0.01）。结论： Ctr、Cpn是小儿肺炎的重要病原体，小儿肺炎中Cpn感染致病的发病年龄有提前趋势，应引起儿科临床足够重视。 　　[关键词] 肺炎；沙眼衣原体；肺炎衣原体；微量免疫荧光法 　　[中图分类号]R446.6 [文献标识码]B [文章编号]1673-7210（2007）12（c）-068-02 　　 　　引起人类疾病的衣原体主要有沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis，Ctr）和肺炎衣原体（Chlamydia pneumoniae ，Cpn）两种，其也是儿童呼吸道感染性疾病的重要病原体。而衣原体仅对大环内酯类抗生素敏感，故了解并及时正确治疗衣原体感染极为重要。微量免疫荧光法(micro-immunofluorescence, MIF)是Wang SP在20世纪70年代建立的,主要用于血清流行病学的研究，对临床诊断也有莫大帮助。为了解儿童肺炎患者Ctr、Cpn感染情况，本课题组应用MIF对我院2005年1月~2006年12月间小儿肺炎患者中疑似衣原体肺炎者血清进行检测，现报道如下： 　　 　　1材料与方法 　　 　　1.1研究对象 　　2005年1月～2006年12月收入我院儿科住院的肺部感染患儿。入选年龄为新生儿～14岁，共1563例，其中28 d组306例、1～11个月组337例、1岁～2岁11个月组398例、3～5岁11个月组342例、6～14岁组180例。 　　1.2方法 　　选取临床疑似病例392例接受了微量免疫荧光试验检测。留取入院次日及恢复期双份静脉血标本，分离出血清后-20℃保存待检，用倪安平[1]和Wang SP等[2]描述的微量免疫荧光法检测血清IgG和IgM抗体，对于符合Cpn感染而又有慢性感染迹象者加检查抗Cpn-IgA抗体。IgM阳性血清标本进一步检测类风湿因子(RF)以排除假阳性。所用抗原由北京协和医院提供，结合物是兔抗人IgG和羊抗人IgM荧光抗体(Sigma公司)。羊抗人IgA荧光抗体是德国Enroimmun公司产品。Cpn感染的血清学诊断标准为①急性感染：双份血清抗体效价升高4倍以上，或IgM≥1∶16，IgG≥1∶512；②既往感染1∶16≤IgG≤1∶256且IgM1∶16；③再次感染：IgG常在1~2周出现，且效价很高≥1∶512，而IgM测不出或效价很低；④Cpn慢性感染：Cpn -IgA≥1∶100且排除急性感染。Ctr感染的血清学诊断标准[3,4]：双份血清IgG抗体效价升高4倍以上，或IgM≥1∶16。 　　1.3 统计学分析 　　计数资料采用卡方检验，计量资料采用t检验。 　　 　　2结果 　　 　　2.1微量免疫荧光法检测结果 　　1 563例患儿入院时诊断为肺炎，其中有392例接受了微量免疫荧光法检测，133例阳性（8.51%，44例Ctr、89例Cpn现症感染），Ctr肺炎组年龄（2.02±1.82）个月，Cpn肺炎组年龄（62.42±30.07）个月，两组间比较，t=18.75，差异有统计学 　　 　　意义（P0.001）。其中，男孩87例，女孩46例，男女比例为1.89∶1；年龄9 d～13岁，中位年龄3.75岁。Ctr、Cpn现症感染在 28 d、1～11个月、1岁～2岁11个月、3～5岁11个月、6～14岁组分别有29和0例、14和4例、1和12例、0和47例、0和26例； 28 d、1～11个月、1岁～2岁11个月、3～5岁11个月和6～14岁组患儿Cpn肺部感染率逐次增高，分别为0，1.19%，3.02%，13.74%，14.44%，中间三组每后一组均比前一组明显增高，差异有显著性（P0.05）。而3～5岁11个月组和6～14岁组Cpn肺部感染率无显著性差异。Ctr肺部感染率则随年龄组递增而逐次减低，分别为 9.48%，4.15%，0.25%，0，0，前3个年龄组每相邻两组差异非常显著（P0.01）。本研究发现有Cpn慢性感染者2例，再次感染者5例。见表1