臭氧对兔膝关节骨性关节炎作用的实验的-研究.pdf

只兔随机分为2组，分别为治疗组16只，模型组16只，采用Hulth模型， 自手术当日起肌注普鲁卡因青霉素40万u，每日一次，连续3天；治疗 组每日向治疗组兔左膝关节腔内注射40rag／L0：一0，混合气体2ml，连续 注射7天；对照组每日向对照组兔左膝关节腔内注射40mg／L0：2ml，连 续注射7天；连续注射7天后，耳缘静脉注入空气处死实验兔，将实验兔 的左膝关节备皮，碘伏消毒，切开左膝关节腔，行大体观察，锐利刀片切 取左侧股骨内髁关节软骨修剪成1×1×2mm的小条；3％戊二醛酸固定24 小时；O．1M磷酸缓冲液冲洗3次；0．1％四氧化锇固定90min；去离子水冲 洗3次；不同浓度丙酮逐级脱水；脱钙液脱钙后以61G环氧树脂浸透、包 埋、硬化后修块，半薄切片；定位后切0．05ram超薄切片，电子染色后电 镜观察。结果：OA对照组大部分的软骨细胞明显肿胀且形态不规则，细 胞周晕消失，粗面内质网明显扩张，微绒毛断裂且变短，粗面内质网网膜 溶解断裂，胞浆内可见脂滴存在；细胞核形态不规则，细胞核严重变形、 凹陷，出现腔隙陷窝及囊泡形成等改变；0，实验组软骨细胞大部分均正 常，细胞为椭圆形或梭形，细胞核完整，可见细胞核内异染质轻度边集， 线粒体散在分布于胞浆内，粗面内质网较对照组丰富，表面可见许多微小 突起。结论：03试验组的关节软骨细胞退变的程度较oA对照组减轻，软 骨缺损也较轻，表明0，能有效延缓关节软骨退变的病理进程。 二、03对软骨细胞中IL-1B表达的影响 将36只兔随机分为3组，分别为治疗组16只，模型组16只，正常组4 只，采用Hulth模型，自手术当日起肌注普鲁卡因青霉素40万u，每日 一次，连续3天；治疗组每日向治疗组兔左膝关节腔内注射40rag／L0： 一0，混合气体2ml，连续注射7天；对照组每日向对照组兔左膝关节腔 内注射40rag／L0：2ml，连续注射7天；连续注射7天后，耳缘静脉注入 空气处死实验兔，将实验兔的左膝关节备皮，碘伏消毒，切开左膝关节腔， 耳缘静脉注入空气栓塞处死实验兔，造模的左膝关节备皮，消毒，切开膝 关节，刀片切取左侧股骨内髁软骨修剪成1×1×2mm小条，3％戊二醛酸 溶液固定24小时；DAB法检测软骨细胞IL一1D；每张切片在软骨破坏的 边缘随机选取视野，每个视野计数200个细胞，统计阳性染色细胞的个数， 以阳性细胞率作为IL-1D的表达指标。结果：正常组(A组)阳性细胞率 59士4．431／,①，0， 为2．815士0．827％，模型组(B组)阳性细胞率为47．1 有统计学意义。结论：实验组软骨细胞中IL-1D含量低于对照组，提示 O，能够降低软骨细胞中IL-1p含量，保护关节软骨。 三、03对关节液中一氧化氮含量的影响 ．，， icioxide，NO) 目的：观察03对Hulth模型OA关节液中一氧化氮(nrt 的含量的影响。方法：32只兔随机分为2组，分别为治疗组16只，模型 组16只，采用Hulth模型，自手术当日起肌注普鲁卡因青霉素40万U， 7…”吨 每日一次，连续3天；治疗组每日向治疗组兔左膝关节腔内注射#0mg ／Lo：一0，混合气体2ml，连续注射7天；对照组每日向对照组兔左膝关 节腔内注射4 以速眠新II号注射液(0．2ml／kg)肌肉内注射麻醉，麻醉效果满意后， 将造模的左膝关节备皮，碘伏消毒，膝关节穿刺，刺入关节腔后，用1ml 0 生理盐水冲洗关节腔，反复注入、回抽3次后，抽尽液体，注入试管，-7 ℃封存备测；硝酸还原酶法测定关节液中NO的含量。结果：对照组No 的含量为145．57±12．17，实验组为132．33±11．14，经统计学分析，实 验组与对照组比较p0．05，有统计学意义．结论：实验组关节液中NO含， 量低于对照组，提示O，能够降低关节液中NO含量，保护关节软骨。