灰绿曲霉β-葡萄糖苷酶分离纯化与性质.pdf

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灰绿曲霉肛葡笱糖苷酶分离纯化及性质 表明较低浓度SDS即可对BG活力有较强的抑制作用。以荧光发射光谱研究酶 经不同浓度盐酸胍和SDS变性后的分子构象变化,结果显示,酶经变性后,338 nm荧光发射峰逐渐红移,说明酶分子充分伸展,变性完全。比较酶经盐酸胍和 SDS变性后的活力与构象变化的关系,表明酶在盐酸胍和SDS溶液中的失活均 先于其去折叠的过程,这种活力丧失快于酶分子整体构象变化的现象表明酶活性 中心处于对变性剂较为敏感的区域。 优化灰绿曲霉纤维素酶水解稻草粉产糖条件发现,在100ml含3%稻草粉的 ml。 5.0,酶液用量12 酶解体系中发酵产糖最适条件为:温度55℃,酶解体系pH 在此条件下,发酵24h后,还原糖浓度为13.1 mg/ml,稻草粉糖化率为39.1%。 关键词t灰绿曲霉p.葡萄糖苷酶分离纯化酶学性质糖化 2 灰绿曲霉p葡萄糖苷酶分离纯化及性质 Abstract A fromfermentation ofAspergillus 13-1,4-glucosidase(BG)waspurified liquor sulfate filtrationon procedures:ammonium gtaucusbyfollowing precipitation,gel G·1 on FastFlow. Sephadex00,andhydrophobicchromatographyPhenylSepharose onsalicindeterminedtobe1747.4 molecular The activity Was specific U/mg.The 92.5 ofthis Wasdeterminedtobe23.5kDaand kDawithSDS—PAGE weight enzyme and on G-1 thatBGisatetramer. filtration gel Sephadex00,respectively,indicating at its The wasstablethe from3.0to maximum enzyme pHranging 7.5,and activity wasobtainedat 3.6.The increasedinthe from pH enzymaticactivitygradually range at Wasstablebelow650C. 40to a decreaseoccurred650C.It 600C,butsharp

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