灰绿曲霉肛葡笱糖苷酶分离纯化及性质
表明较低浓度SDS即可对BG活力有较强的抑制作用。以荧光发射光谱研究酶
经不同浓度盐酸胍和SDS变性后的分子构象变化,结果显示,酶经变性后,338
nm荧光发射峰逐渐红移,说明酶分子充分伸展,变性完全。比较酶经盐酸胍和
SDS变性后的活力与构象变化的关系,表明酶在盐酸胍和SDS溶液中的失活均
先于其去折叠的过程,这种活力丧失快于酶分子整体构象变化的现象表明酶活性
中心处于对变性剂较为敏感的区域。
优化灰绿曲霉纤维素酶水解稻草粉产糖条件发现,在100ml含3%稻草粉的
ml。
5.0,酶液用量12
酶解体系中发酵产糖最适条件为:温度55℃,酶解体系pH
在此条件下,发酵24h后,还原糖浓度为13.1
mg/ml,稻草粉糖化率为39.1%。
关键词t灰绿曲霉p.葡萄糖苷酶分离纯化酶学性质糖化
2
灰绿曲霉p葡萄糖苷酶分离纯化及性质
Abstract
A fromfermentation
ofAspergillus
13-1,4-glucosidase(BG)waspurified liquor
sulfate filtrationon
procedures:ammonium
gtaucusbyfollowing precipitation,gel
G·1 on FastFlow.
Sephadex00,andhydrophobicchromatographyPhenylSepharose
onsalicindeterminedtobe1747.4 molecular
The activity Was
specific U/mg.The
92.5
ofthis Wasdeterminedtobe23.5kDaand kDawithSDS—PAGE
weight enzyme
and on G-1 thatBGisatetramer.
filtration
gel Sephadex00,respectively,indicating
at its
The wasstablethe from3.0to maximum
enzyme pHranging 7.5,and activity
wasobtainedat 3.6.The increasedinthe from
pH enzymaticactivitygradually range
at Wasstablebelow650C.
40to a decreaseoccurred650C.It
600C,butsharp
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