拮抗菌共培养制备育苗基质对防治番茄猝倒病试验效果初析.docVIP

拮抗菌共培养制备育苗基质对防治番茄猝倒病试验效果初析 　　摘 要：用半发酵腐熟的菇渣或酒糟添加一定的营养助剂与拮抗菌假浅灰链霉菌共培养后制备成抗病育苗基质，应用该基质进行番茄抗猝倒病育苗试验，结果表明，该基质能够有效发挥其拮抗作用，减少番茄苗期猝倒病发病率，对番茄苗的株高和茎粗有所增加，表现出一定的促生长作用；半发酵腐熟的菇渣与酒糟基质相比，拮抗菌共培养菇渣制备的基质对瘁倒病的防控率更优。 　　关键词：拮抗菌；共培养；番茄；育苗基质 　　中图分类号：S436.412.1+1 文献标识码：A DOI 编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2015.05.027 　　猝倒病是由致病性腐霉菌属（Pythium spp.）引起的真菌病害[1-2]，是世界著名的毁灭性病害，可为害茄子、番茄、辣椒、黄瓜、甘篮、芹菜、洋葱、菜豆、莴苣等多种蔬菜幼苗，是中国保护地春秋季育苗中常见病害，一般苗圃发病率为20%～50%，严重时可达80%以上，目前在基质育苗中也较为突出，给农业生产造成了巨大的经济损失。目前，国内对猝倒病的防治仍以化学防治为主[3]，但其严重污染环境，而且随着药剂使用时间的延长，还诱导病原菌的抗病性，因此开发绿色的猝倒病防控技术受到广泛关注[4-6]。 　　蔬菜工厂化基质育苗技术[7-8]一直是蔬菜产业化发展的方向，而均有生防功能的基质[9-10]更是这一领域的研究热点。本研究以实验室分离保藏的终极腐霉拮抗菌假浅灰链霉菌内4（Streptomyces pseudogriseolus）作为拮抗菌剂，通过与酒糟、菇渣等初步发酵后的生物质固体废弃物进行共培养后作为育苗基质，通过接种终极腐霉病原微生物考察拮抗功能基质对育苗瘁倒病的影响，以期为克服或减轻番茄等苗期猝倒病害提供生防育苗基质奠定基础。 　　1 材料和方法 　　1.1 试验蔬菜种子、菌株及培养方法 　　供试番茄品种为浙杂205；瘁倒病拮抗菌株内4（Streptomyces pseudogriseolus，下简称内4）由本实验室分离保藏。猝倒病病原菌株终极腐霉（Phthium ultinum，ACCC36075，下简称36075）购于中国农业微生物菌种保藏中心。 　　拮抗菌株内4采用高氏一号放线菌培养基，瘁倒病病原菌的培养采用PDA培养基。 　　1.2 基质材料及共培养基质 　　常规基质原料分别采用发酵腐熟的黄酒酒糟和金针菇栽培后菇渣；共培养基质选择半发酵腐熟的酒糟和菇渣，接种拮抗微生物前，先加入10%的麸皮和1%的酵母膏，调节含水率至40%～50%。 　　1.3 抗病功能基质和致病菌剂制备方法 　　拮抗菌株内4在斜面活化后，进行液体培养基扩培，将扩培后的对数期种子液，按照2%的接种量接种至共培养基质中，充分搅拌混匀后，在28 ℃环境条件下培养5～7 d，培养结束后用于育苗试验。 　　瘁倒病病原菌在培养基斜面活化后，进行液体培养基扩培，培养基中加入玻璃珠，使菌丝体分散，培养至对数期后用于育苗基质接种。 　　1.4 育苗试验与测定 　　选择番茄种子进行拮抗基质育苗试验，试验设置常规基质接种致病菌、拮抗菌共培养基质、拮抗菌共培养基质接种致病菌等3个处理，采用25穴的育苗盘，试验重复3次。播种之前将共培拮抗基质及常规基质材料、珍珠岩和蛭石分别按照8∶1∶1的比例混合均匀，再按照6 g?kg-1的量将复合肥（15-15-15）和2%的10倍稀释致病菌培养液按照比例与基质混合均匀。种子在28 ℃培养箱中催芽，待出芽后及时播种于穴盘中。定期考苗，记录发病率，试验结束后每个重复随机抽取10株测定株高及茎粗等。本试验数据用DPS8.0 软件进行统计分析。 　　2 结果与分析 　　2.1 拮抗菌假浅灰链霉菌内4对菇渣基质番茄育苗的影响 　　以菇渣作为假浅灰链霉菌内4的共培养基质，播种番茄种子后，对番茄苗的发病死亡率进行统计，结果如图1所示。从图中可见，不接种终极腐霉病原菌的拮抗菇渣基质中番茄苗的发病死亡率较低，为10.66%，而接种终极腐霉的拮抗菌共培养基质中番茄发病率死亡率为17.33%，略高于不接种终极腐霉的处理，而常规菇渣基质对照中，由于接种了瘁倒病致病菌，番茄苗死亡率较高，达62.63%，显著高于其他两个处理（P0.05）。以上结果说明，通过在半发酵腐熟中的菇渣基质中添加一定的营养助剂，并接种终极腐霉拮抗菌假浅灰链霉菌内4进行共培后，能够有效发挥其拮抗作用，减少瘁倒病发病率。 　　试验结束后，测定番茄苗的株高及茎粗，结果如图2和图3所示。采用拮抗菌接种的菇渣共培养基质的2个处理中，接种致病菌的拮抗菇渣基质中的番茄苗株高要小于不接种病原菌的拮抗菌菇渣基质，但均要大于接种病原菌的常规菇渣基质。经Tukey方差分析表明，2个拮抗菌共培养菇渣