北京理工大学邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告.doc

邻二氮菲分光光度法测定铁 刘红阳1120123063 一、 实验目的 1、 学习测定微量铁的通用方法： 2、 掌握分光光度法分析的基本操作及数据处理方法； 3、 初步丫解分光光度法分析实验条件研宄的一般做法。 二、 实验原理 一般选择络合物的最大吸收波长为工作波长。控制熔液酸度是显色反应的重 要因素。因为多数显色剂是有机弱酸或弱碱，溶液的酸度会直接影响显色剂的理 解程度，从而影响显色反应的完全程度及络合物的组成。另一方面，酸度大小也 影响着金属离子的存在状态，因此也影响了显色反应的程度。应当确定显色剂加 入量的合适范围。不同显色反应的络合物达到稳定所需耍的时间不同，且达到稳 定后能维持多久也大不相同。大多数显色反应在室温下就能很快完成，但有些反 应必须加热才能较快进行。此外，加入试剂的顺序、离子的氧化态、干扰物质的 影响等，均需一一加以研究，以便拟定合适的分析方案，使测定既准确，又迅速。 木实验通过对铁（II）-邻二氮菲显色反应的条件实验，初步了解如何拟定一个分 光光度法分析实验的测定条件。 邻二氮菲是测定铁的高灵敏性、高选择性试剂之一，邻二氮菲分光光度法是 化工产品屮微量铁测定的通用方法。在pH2?9的溶液中，Fe2+和邻二氮菲生成1:3 橘红色络合物，lgP3=21.3（20°C）, e^l.lXlOt-mol-1-cm1,其吸收曲线如 图一所示；F#亦可以与邻二氮菲生成蓝色络合物，因此，在显色前需用盐酸羟 胺溶液将全部的Fe3+还原为Fe2+。反应式如下（和图二）： 2Fe3t+2NH2OH===2Fe2f+N2 t +2H.0+2H 图一图二 图一 图二 用分光光度法测定物质的含量，一般采用校准曲线法（又称工作曲线法）， 即配制一系列浓度有小到大的标准溶液，在选定条件下依次测量各标准熔液的吸 光度A，在被测物质的一定浓度范围内，溶液的吸光度与其浓度呈线性关系（邻 二氮菲测Fe2+，浓度在0~5.0pg*niLH范围内呈线性关系）。以溶液的浓度为横 坐标，相应的吸光度为纵坐.标，绘制出校准曲线。测绘校准曲线一般要配制3?5 个浓度递增的标淮溶液，测出的吸光度至少耍有三个点在一条直线上。作图时， 坐标选择要合适，使测量数据的有效数字位数与坐标的读数精度相符合。 测定未知样时，操作条件应与测绘校准曲线时相同。根据测得的吸光度从校 准曲线上查出相应的浓度，就可计算出试样中被测物质的含量。通常应以试剂空 白溶液为参比溶液，调节仪器的吸光度零点。 三、 实验试剂与仪器 试剂：1. Omol ? L—1 乙酸钠溶液，0. lmol ? I?柠檬酸（H3C6H5O7. H20）溶液,5. 0% 盐酸羟胺（NH20H ? HC1）溶液，0. 20%邻二氮菲溶液，40. 0 u g ? mL 1标准铁溶液。 仪器：722型分光光度计（配两只1.0cm比色皿），比色管若干，5mL移液管， 洗耳球，10mL量筒，胶义?滴管，烧杯，洗瓶，擦镜纸。 四、 实验步骤 （1） 确定工作波长：移取2. OOmL标准铁溶液注入比色管中，加入l.OmL 盐酸羟胺溶液，混匀后放置2min。加1. OmL邻二氮菲熔液和2. OmL乙酸钠熔 液，加水至25mL标线，摇匀。以水为参比，在不同波长卜测量相应的吸光度 （从440nm到560nm，间隔10nm测量一次吸光度，其中在50（T520nm之内， 间隔5nm测量一次），确定适宜的工作波长（即选取吸光度最大值对应的波 长）。 （2） 校准曲线的制作：在六支比色管中分别加入0,0. 5, 1.0, 1.5, 2. 0,2. 5 mL标准铁溶液，各加入1. OmL盐酸羟胺溶液，混匀后放置2mino各加入1. OmL 邻二氮菲溶液和2. OmL乙酸钠溶液，加水稀释至标线，混匀。以试剂空白为 参比，在选定的工作波长下测量各溶液的吸光度。并以铁的浓度［Pg* ml? 或Ug* （25mL）H］为横坐标、相应的吸光度为纵坐标，绘制校准曲线。 ⑶未知样铁浓度的测定：取2. 5mL未知铁样溶液于25mL比色管中，与标 准曲线配制标准溶液一样的方法配制测混合液，并测其吸光度。 五、实验数据记录与处理 （1）确定工作波长 在400?560?（间隔lOnm测量一次）波长卜测得相应的吸光度如卜表所示: 波长/nm 440 450 460 470 480 490 吸光度A 0. 434 0. 466 0. 502 550 567 576 500 510 520 530 540 550 560 0. 594 0.619 0.589 0.479 0.328 0.201 0. 126 在500520nm每隔5nm测量一次，结果如卜: 波长/nm 500 505 510 515 520 吸光度A 0. 595 0. 609