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珠芽魔芋核型剖析 　　摘要：对珠芽魔芋根尖?胞有丝分裂染色体进行核型分析，结果表明：珠芽魔芋体?胞染色体数目为 2n=39 ，染色体基数X=13 ，核型公式为：2n=3X=39=33m+6sm，染色体长度类型公式：2n=39=9L+6M2+15M1+9s,全组染色体总长697.31um，核不对称系数为59%。属于Stebbins核型分类中的“2B”型。 　　关键词：珠芽魔芋；染色体；核型 　　 　　珠芽魔芋（Amorphophallus bulbifer (Roxb.) Blume）属于天南星科魔芋属（Amorphophallus Blume ex Decaisne），多年生草本植物。珠芽魔芋属大型魔芋，其茎秆粗壮，抗病性强。珠芽魔芋珠芽类魔芋是在叶面上生长有气生球茎的一大类魔芋，从目前获得的研究结果至少有3个种。它们是从云南边境野生环境引种并驯化栽培成功的独特魔芋种，国内其它省份无此种源。常见的繁殖方式有4种：种子繁殖、气生珠芽球茎繁殖、小球经繁殖、大球茎切块繁殖。魔芋的球茎含魔芋葡甘聚糖，也是唯一分布广、适应性强、可大量提取葡甘聚糖的植物。现它已广泛的应用到食品、医药和环保等行业。 　　关于魔芋染色体数，国内外曾有多种报道:2n=24、26、28、39等，但对于珠芽魔芋核型分析未见详?报道，通过对珠芽魔芋核型的分析，旨在进一步确定珠芽魔芋的染色体数目和形态，为珠芽魔芋的起源、演化、良种培育以及分子生物学的研究提供必要的?胞学材料。 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 　　本实验所用材料为珠芽魔芋，由湖北民族学院生科院余展深教授从云南引种栽培。在天气渐暖后种植，待其根的生长处于最佳状态即要求侧根约1cm（因为侧根处于分裂期的数目多，而且受环境影响较小）并且根数量满足实验所时进行取材。 　　1.2 方法 　　1.2.1染色体制片。本实验主要采用压片法和去壁低渗法[5]：去壁低渗法是在除去?胞壁的条件下，利用表面张力而使染色体自行铺展。它的优点是任何植物和器官，在充分的酶解的条件下，均可使活动的染色体铺展平整而形态比较清晰的制片。我国的陈瑞阳等（1979，1982）用这一方法制备了37科105中植物的染色体标本，取得了良好的效果。 　　待材料根尖长至1 cm左右时，取生长健壮，?胞处于分裂旺盛期的根尖。在试验过程中，从早上7点开始，每隔1个小时取材并观察处于分裂期的?胞数目。选取最佳的取材时间，然后对材料采用药剂处理，处理药剂为0.1%秋水仙素。处理时间分别为：0.5h 、1h、 1.5h、 2h、 2.5h 、3h 、3.5h 、4h。再用0.075%mol/LKCL溶液进行前低渗处理根尖25分钟。用蒸馏水冲洗2～3次放入卡诺固定液中固定。用蒸馏水清洗根尖上的酒精，于1mol/LHCL中在60℃恒温水浴条件下解离8～10分钟。再用蒸馏水漂洗2次，每次5分钟，用2%纤维素酶+0.5%果胶酶解离0.5小时。吸去酶液，用双蒸水洗2次，再在双蒸水中低渗处理20分钟。取出后染色并制片，镜检并找出染色体铺展良好，收缩适度、无失散现象、没有或很少重叠的有丝分裂中期?胞，先用光学显微镜观察，然后将其放入Olmypus BX61显微镜上观察，用DP71显微摄像系统拍照，用IPP图像处理软件处理并储存为JPG格式。 　　1.2.2染色体计数。选择染色体数目清晰且形态较为短粗的50个?胞分别统计其染色体数目。 　　1.2.3核型分析。分析方法根据陈瑞阳等的标准进行，选择图像清晰的图片，用photoshop图片处理技术，对珠芽魔芋染色体的各个指标进行测量和计算，并用spss统计分析软件对各项指标进行分析，并依据分析结果对染色体进行分组配对。最后用excel进行数据整理和图表绘制。 　　2 结果与分析 　　2.1 取材时间及处理时间与?胞分裂关系 　　经过5个不同时间的取材及实验发现上午7点以前9点以后基本没有处于分裂期的?胞，而上午8点为最佳取材时期，该时间段内，?胞分裂旺盛，便于进行染色体计数和核型分析。 　　经0.1%秋水仙素不同时间预处理珠芽魔芋的根尖后，制片后观察染色体形态的效果，发现珠芽魔芋侧根用0.1%的秋水仙素处理时间小于2小时，则染色体?长；大于3小时，染色体短粗，这种处理下的染色体便于进行染色体计数。处理2~3h时染色体长度适中，形态清晰，分散良好，便于分析。 　　2.2珠芽魔芋染色体数目 　　以50个染色体分散良好的珠芽魔芋?胞进行染色体观察计数。观察过程中出现非整倍变性和多倍现象。其中染色体数目及所占比例分别为：39（84%）、26（6%）、13（4%）、37（2%）、33（2%）、29（2%）、40（2%），可以确定珠芽魔芋?胞染色体数目为2n=39。 　　2.3 珠芽魔芋染色体各项