乳清蛋白的提取纯化及其多肽水解条件优化的-研究.pdfVIP

乳清蛋白的提取纯化及生物活性肽的制备研究 摘 要 本文本着可持续发展、充分利用资源的原则，立足于新疆具有地方特色的奶酪制品加工业，将 奶制品加工的副产物乳清作为开发重点，通过运用生物技术研制出新型的乳清功能性产品，为乳清 资源的高效利用和工业化生产提供理论指导和技术帮助。提高原料乳的综合利用率，进而带来一定 的经济效益。 (1)本论文通过对 CaCl2 絮凝沉淀乳清工艺条件的研究，采用正交试验确定最佳絮凝条件。分别 研究了pH 值、1mol/LCaCl 添加量和温度对乳清中蛋白含量、脂肪含量及透光率的影响；通过三因 2 素三水平正交实验确定乳清的最佳絮凝条件：pH7.5 ，1mol/LCaCl 的添加量为 12mL/L ，在 60℃水 2 浴缓慢搅拌絮凝 15min。在此条件下，处理后的乳清蛋白损失率只有 13.6%，脂肪去除率达到 86% 以上，透光率也有了显著提高。 (2)采用超滤和离子交换层析相结合的方法对乳清蛋白进行纯化，选用分子量为 10KDa 的超滤膜 对乳清蛋白进行分离纯化，研究操作温度、操作压力和超滤时间对膜通量及蛋白截留率的影响。通 过实验得出最佳分离条件：采操作压力为0.2MPa 、温度35℃~40 ℃条件下，膜通量最大；超滤时间 100min 后就需对超滤膜进行清洗。选用阴离子交换树脂对其进一步纯化，研究不同树脂、不同上样 缓冲液pH 值和不同洗脱液离子强度对蛋白吸附程度的影响。结果表明：经过筛选DEAE A-52 为柱 填充材料，在pH8.35 ，洗脱液离子浓度0.8mol/L 的条件下，提取纯化的蛋白含量为87.4%，并且通 过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得所提取的蛋白中含有高纯度的β- Lg 和α- La 。 (3)使用碱性蛋白酶水解乳清蛋白制备乳清蛋白多肽，采用正交实验确定最佳酶解条件。分别研 究酶与底物质量比、底物浓度、温度、pH 值对水解度的影响；采用正交实验设计，确定碱性蛋白酶 制备蛋白多肽的最佳水解条件： pH9.0、水解温度50℃、酶与底物质量比为7%、底物浓度2% 、水 解时间3h，最优工艺条件下水解度为27.6% 。 关键词：乳清蛋白，分离纯化，酶解，蛋白多肽 I 乳清蛋白的提取纯化及其多肽水解条件优化的研究 I 乳清蛋白的提取纯化及生物活性肽的制备研究 Abstract Sustainable development and make full use of resources as the principle, based on the Xinjiang local cheese products processing industry, dairy processing the byproduct whey was as a key to development. Through the use of biotechnology to develop new whey functional products, technical parameters and theoretical guidance for whey the comprehensive utilization of resources and industrial production was provided to improve the comprehensive utilization of raw milk and bring some economic benefits. (1)In this paper the optimum conditions by CaCl2 flocculation precipitation whey was studied by orth