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阿莫西林双氯西林测定技术剖析 　　[摘 要]目的 建立阿莫西林双氯西林钠胶囊中阿莫西林和双氯西林钠的含量测定方法。方法 采用Shimadzu VPODS色谱柱，流动相为0.008 mol/L十二烷基硫酸钠（用磷酸调节至pH4.5）甲醇（体积比68∶32），检测波长225 nm。 结果 阿莫西林和双氯西林在该色谱条件下均有合适的保留，测定可在10 min内完成。阿莫西林在0.0050～1.0000 mg/mL，双氯西林在0.0025～0.5036 mg/mL质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系。阿莫西林和双氯西林钠平均回收率（n=9）分别为99.4%（RSD=1.0%）和99.1%（RSD=0.97%）。 结论 该方法准确、重复性好、灵敏度高， 可用于该产品的质量控制。 　　[关键词]阿莫西林 双氯西林 测定技术 　　中图分类号：TD525 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2014）10-0266-01 　　阿莫西林、双氯西林属β内酰胺类抗生素，阿莫西林对需氧革兰氏阳性菌及部分革兰氏阴性菌具抗菌活性，双氯西林具耐酸、耐酶等特点，对葡萄球菌和革兰阳性菌具抗菌活性。研究表明，阿莫西林―双氯西林对常见的病原菌具良好抗菌作用，对伤寒沙门菌也具有良好抗菌作用，可作为 治疗 呼吸道感染、单纯性皮肤软组织感染和伤寒等的首选药物之一。该品种目前在 中国 药典、美国药典、日抗基和英国药典均未收载。 文献采用HPLC法同时测定阿莫西林、双氯西林的含量，以磷酸盐缓冲液和乙腈为流动相。但是阿莫西林和双氯西林的极性相差较大，两者的保留时间相差较大，在该色谱条件下为了保证双氯西林有适宜的保留时间，阿莫西林往往在溶剂峰左右出峰，几乎没有保留。本文经优化色谱条件，改用离子对试剂和甲醇为流动相的RPHPLC法，使两者均具有适宜的色谱保留时间，可用于阿莫西林和双氯西林制剂的含量测定。 　　1 仪器和试药 　　Agilent 1100高效液相色谱仪，Sartorius BP211D万分之一 电子 天平。 　　甲醇（色谱纯，天津四友生物医学技术有限公司出品，批号：051221101）；十二烷基硫酸钠（广州市医药公司进口分装，批号：980503）；阿莫西林对照品（中国药品生物制品检定，批号：130409200208，质量分数：86.2%）；双氯西林对照品（Bright？ Future？ Pharm.Fty， 批号：B4520042，质量分数：91.4%）；阿莫西林双氯西林钠胶囊（香港澳美制药厂提供，规格：0.375 g）；实验用水为超纯水。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件 　　色谱柱：Shimadzu VPODS（ 250 mm×4.6 mm）；流动相：0.008 mol/L十二烷基硫酸钠（用磷酸调节pH值至4.5）甲醇（体积比68∶32）；流速1 mL/min；检测波长 225 nm；进样量20 μL。 　　2.2 溶液的制备 　　2.2.1 对照品溶液的配制 　　取阿莫西林、双氯西林对照品适量，精密称定，加0.02 mol/L磷酸盐缓冲液制成每1 mL含阿莫西林50 μg、含双氯西林25 μg的混合液，作为对照品溶液。 　　2.2.2 供试品溶液的配制 　　取供试品20粒，除去囊壳，均匀研细并混合，精密称取适量（约相当于阿莫西林200 mg，双氯西林100 mg），置200 mL容量瓶中，加0.02 mol/L磷酸盐缓冲液溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取1 mL，置20 mL容量瓶中，加0.02 mol/L磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，用0.45 μm滤膜滤过，取续滤液，即得。 　　2.3 专属性考察 　　取阿莫西林双氯西林钠胶囊内容物，分别用药物光照试验仪强光照射24 h和高温95 ℃进行24 h强力破坏，分别取样品适量，精密称定，加流动相溶解并稀释成含阿莫西林2 mg/mL和双氯西林1 mg/mL的溶液， 用0.45 μm滤膜滤过，精密量取续滤液20 μL，按“2.1”项的色谱条件进样测定。试验结果表明，杂质峰与两主峰均有较好的分离，不影响测定。 　　2.4 线性范围的确定 　　分别取阿莫西林、双氯西林对照品适量，精密称定，用流动相溶解并稀释制成含阿莫西林为0.005 0～1.000 0 mg/mL和双氯西林为0.002 5～0.503 6 mg/mL的溶液，按“2.1”项下的色谱条件进行测定，以峰面积（A）为纵坐标，以质量浓度（ρ）为横坐标，得阿莫西林和双氯西林的线性回归方程分别为：A=27 989ρ-26.88，r=0.999 9（n=7）；A=46 883ρ-48.554，r=0.999 9（n=7）。结果表明，阿莫西林在0.005 0～1.000 0 mg/mL，双氯西林在0.002 5～