磁性纳米粒子的表面功能化及其在蛋白固定中的应用-药物分析专业论文.docxVIP

I I 磁性纳米粒子的表面功能化及其在蛋白固定中的应用 摘 要 摘 要 本论文就 Fe3O4 磁性纳米粒子的制备及其表面功能化，以及其在蛋白固定中的应 用开展了相关工作。 采用共沉淀法合成了表面富含有羟基的大小约 15nm、分布均匀的类似球形的 Fe3O4 磁性纳米粒子，但其有团聚现象，在水溶液中不稳定。用柠檬酸钠对制备好的 Fe3O4 粒子进行表面修饰， 所制备的 Fe3O4-CA 磁性纳米粒子表面富含羧基， 在水 中具有良好的分散稳定性。本文使用分散聚合法制备了 Fe3O4@(PS-co-PAA)磁性高分 子微球，其磁含量为 17%，通过磁筛选可以获得磁性优良的 Fe3O4@(PS-co-PAA)磁性 高分子微球，但所制备的磁性微球在水中的分散稳定性欠佳，限制了其进一步应用。 采用碳二亚胺法制备了 Fe3O4-CA-APE 磁性粒子，并对其制备条件进行了优化。 引入紫外吸光度的模的概念来表征其在水溶液中的分散稳定性和磁响应性。分别考察 了 Fe3O4-CA 磁性粒子的使用量，APE 的使用量，APE 的分子量，封闭试剂的使用等 因素对 Fe3O4-CA-APE 磁性性能的影响。结果表明在摇床振摇下分次加入磁性粒子， 并在反应结束后用 APE 进行封闭，可以明显改善粒子的粒径分布；随着 APE 分子量 的减小，所制备的 Fe3O4-CA-APE 磁性粒子的粒径逐渐减小，与医用磁性粒子相比， 分子量为 1800 的 APE 制备的 Fe3O4-CA-APE 磁性粒子具有较好的分散稳定性和磁响 应性。透射电镜显示，所制备的 Fe3O4-CA-APE 磁性粒子形态各异，大小在几百到几 十纳米不等，与医用磁性粒子类似；热失重曲线显示，Fe3O4-CA-APE 磁性粒子中 Fe3O4 的含量高达 91.87%。使用 Fe3O4-CA-APE-PAA-NHS 磁性粒子为固定载体，以 BSA 为模蛋白，考察了 Fe3O4-CA-APE-PAA-NHS 磁性粒子对 BSA 的固定作用，实验得出 最佳的固定时间为 60 min，并计算出 BSA 的最大固载量为 1908 mg/g。在此基础上， 对抗体进行了固定，实验表明，抗体被成功的固定在磁性粒子上，实验制备的磁性粒 子有望用于免疫分析。 【关键词】 磁性纳米粒子、表面功能化、APE、蛋白固定 作 者：胡紫阳 指导教师：谢洪平 II II Abstract The Surface Functionalization Of Magnetic Nanoparticles And Their Application In Protein Immobilization Abstract This paper focused on the synthesis, functionalization and the applications of Fe3O4 magnetic nanoparticles(i.e. MNPs) in immobilization and separation of protein. Aqueous magnetite nanoparticles were synthesized by coprecipitation method. Magnetite nanoparticles had superparamagnetism with mean diameter of 15 nm, and the shape of nanoparticles was spherical. Fe3O4 MNPs were not very stable under ambient conditions and tended to agglomerating. Based on the rich hydroxyl groups，the surfaces of Fe3O4 MNPs were modified with sodium citrate. With rich carboxyl on the surface, Fe3O4-CA MNPs had good dispersion stability in water. Fe3O4@(PS-co-PAA) magnetic polymer microspheres was synthesized by dispersion polymerization method. The magnetic content was 17%, through the magnetic filter, Fe3O4@(PS-co-PAA) magnetic polymer microspheres with excellent magn