虫草素的分离鉴定及其生物活性研究-微生物学专业论文.docx

万方数据 万方数据 本人完全了解《南开大学关于研究生学位论文收藏和利用管理办法》关于 南开大学(简称“学校”)研究生学位论文收藏和利用的管理规定，同意向南开 大学提交本人的学位论文电子版及相应的纸质本，并委托印刷存档论文。 本人了解南开大学拥有在《中华人民共和国著作权法》规定范围内的学位 论文使用权，同意在以下几方面向学校授权。即： 1.学校将学位论文编入《南开大学博硕士学位论文全文数据库》，并作为 资料在学校图书馆等场所提供阅览，在校园网上提供论文目录检索、文摘以及 论文全文浏览、下载等信息服务； 2.学校可以采用影印、缩印或其他复制手段保存学位论文；学校根据规定 向教育部指定的收藏和存档单位提交学位论文； 3.非公开学位论文在解密后的使用权同公开论文。 4.同意学校将本人向有关电子出版单位授权的学位论文(含电子版和授权 书)转交相关授权单位。 本人承诺：本人的学位论文是在南开大学学习期间创作完成的作品，并已 通过论文答辩；提交的学位论文电子版与纸质本论文的内容一致，如因不同造 成不良后果由本人自负。 本人签署本授权书一份，交图书馆留存。 学位论文作者暨授权人(亲笔)签字： 张琳 2015 年 05 月 29 日 南开大学研究生学位论文作者信息 论 文 题 目 虫草素的分离鉴定以及生物活性研究 姓 名 张琳 学号 2120120901 答辩日期 2 0 1 5 年 5 月 2 1 日 论 文 类 别 博士 □ 学历硕士 √ 专业学位硕士 □ 同等学力硕士 □ 划 √ 选择 学院 ( 单位 ) 生命科学学院 学科 / 专业 ( 专业学位 ) 名称 微生物学 联 系 电 话电 子 邮 箱 HYPERLINK mailto:zhanglin_1122@163.com zhanglin_1122@163.com 通信地址(邮编)： 天津市南开区卫津路 94 号南开大学 非公开论文编号 备注 注：本授权书适用我校授予的所有博士、硕士的学位论文。由作者填写一份并签字后交校图书馆，如已批准为非公开学 位论文，须附批准通过的《南开大学研究生申请非公开学位论文审批表》和“非公开学位论文标注说明”页。 摘要 摘要 虫草素，即 3’-脱氧腺苷，具有抑菌、抗肿瘤、抗衰老、免疫调节等药理活 性，无论在医疗还是在保健食品方面，虫草素都具有巨大的开发价值。本文以 蛹虫草子实体为研究对象，从中分离出单一活性成分虫草素，并对其抗氧化、 抗 HIV-1，免疫调节作用等进行了深入的研究。 蛹虫草子实体经石油醚脱脂、乙醇浸提、NKA-Ⅱ大孔树脂富集、HPLC 分 离和制备，最终得到纯度为 98.5 %的虫草素。经高分辨率质谱检测和核磁氢谱、 碳谱结果分析以及 HPLC 分析可确定所得样品为虫草素单一组分。 抗氧化活性方面，虫草素能明显抑制脂质过氧化，100 μg/mL 时抑制率为 48.7%，同一浓度下，小鼠红细胞溶血抑制率为 25.73%，而在清除 O2-·自由基、 HO·自由基、DPPH 自由基方面，效果不太明显；在 E. coli BL21 ( pET-croGFP ) 这一模型中，虫草素浓度为 200 μg/mL 时，抑制 H2O2 诱发的胞内氧化水平升高的 能力为 51.42 %；虫草素还能显著提高氧化应激模型小鼠体内的 GSH 水平、GSH-Px 酶活力以及小鼠脑脂质过氧化抑制活性，极显著提高 SOD 酶活力，以及小鼠红细胞 溶血抑制活性。 在抑制 HIV-1 病毒复制方面，通过检测在假病毒加入前和加入后 2 h 加药这 两个时间段得知，虫草素能够抑制 HIV-1 假病毒进入细胞，同时低浓度的虫草 素对于整合酶的抑制活性更强，而对于蛋白酶的抑制，则是高浓度的虫草素作 用更强，在 100 μg/mL 时抑制率高于正对照，达到 23 %左右。抗氧化与抗 HIV-1 双检测模型 TZM-BL(pcDNA3.1-croGFP)中，一方面，虫草素在一定程度上可以 抑制 H2O2 引起的氧化应激，另一方面，还能够有效的抑制 HIV-1 假病毒感染 TZM-BL 细胞引起 LTR 的激活作用，从而抑制病毒的复制。 虫草素还能显著上调 Th1 型细胞因子 IFN-γ，并下调 IL-4 和 IL-10 等 Th2 型细 胞因子的表达水平。综上，本研究从蛹虫草中分离出虫草素单一组分，从抗氧化、 抗 HIV-1 以及免疫调节等方面探究其生物活性，并对其抗氧化和抗 HIV-1 之间的关 系进行探讨，为开发新型抗艾滋药物提供一定的基础，具有良好的应用前景。 关键词：虫草素；分离；结构鉴定；生物活性 I Abst Abstract Abstract Cordycepin, 3’-deoxyadenosine, this