雌激素对白假丝酵母菌HWP1基因表达的影响-临床检验诊断学专业论文.docxVIP

汕头大学医学院硕士研究生毕业论文 汕头大学医学院硕士研究生毕业论文 I I 中文摘要 背景 外阴阴道念珠菌病（Vulvovaginal candidiasis，VVC）是一种常见的妇女疾病， 据资料 统计，至少有75%的妇女一生中至少罹患过一次该病。复发性外阴阴道念珠菌病（Recurrent vulvlvaginal candidiasis，RVVC）指一年中发生4次或以上的外阴阴道念珠菌病。白假丝酵 母菌是引起该病的主要病原，其致病机制主要包括黏附、利于侵入的酶以及表型转换等。 阴道内的假丝酵母菌克隆性增生与患者年龄、雌激素的影响、妊娠、疾病所致的易感性有 关，现已明确白假丝酵母菌引起的感染经常与性激素的存在有关。雌激素与白假丝酵母菌 感染关系的研究很多，它可通过改变机体的免疫状态、影响细菌的毒力、改变阴道内环境 等方面影响外阴阴道念珠菌病的发生。白假丝酵母菌菌丝壁蛋白1（HWP1）是已知的白假 丝酵母菌芽管和菌丝的特异性蛋白之一，因其在假丝酵母菌的黏附过程中起重要作用而成 为近年来的研究热点。目前在我国对HWP1基因的研究相对较少，为此我们进行了下列研 究。 目的 探讨雌激素对白假丝酵母菌毒力基因HWP1表达的影响，从而明确雌激素对白假丝酵母 菌致病力的影响。 材料、方法 1. 不同浓度雌激素对白假丝酵母菌的影响 临床标本收集：临床标本采集时间为2009年1月～2009年12月，北京大学深圳医院妇 科门诊VVC患者阴道分泌物标本，筛选除外肿瘤、妊娠、糖尿病等伴VVC患者，经镜检假 菌丝阳性且分离出假丝酵母菌，鉴定分离菌株。随机选取33株白假丝酵母菌（其中5株为 RVVC患者，28株为VVC患者）分别加入空白对照、10-6M、10-7 M、10-8 M的雌激素于YPD 培养基，35℃，160rpm，震荡培养24小时。 2. HWP1基因检测 II II 收集经不同浓度雌激素培养的各菌株的菌液，提取其 RNA，进行 RT-PCR（白假丝酵 母菌管家基因 ACT1 作为内参），并对结果进行统计分析。 结果 根据对 HWP1m RNA RT-PCR 结果的统计学分析得出： 1. 10-6M 组比 10-8 M 组及空白对照组的 HWP1 表达量显著升高，差异（P＜0.01）有 极显著的统计学意义，10-6M 组比 10-7 M 组 HWP1 表达量相对升高，差异（P＜0.05）有统 计学意义。 2. 10-7 M 组比 10-8 M 组及空白对照组的 HWP1 表达量显著升高，差异（P＜0.01）有 极显著的统计学意义。 3. 10-8M 组比空白对照组的 HWP1 表达量相对升高，差异（P＜0.05）有统计学意义。 4. 同一雌激素浓度下各菌株间 HWP1 表达量差异（P＞0.05）无统计学意义。 结论 1 HWP1 的表达量随着雌激素的浓度升高（10-8 M、10-7 M、10-6M）而增加，说明雌激 素能够促进 HWP1 基因的表达，从而能够提高白假丝酵母菌的致病性，提高外阴阴道念珠 菌病的发病率。 2 同一雌激素浓度下各菌株之间 HWP1 的表达量差异（P＞0.05）无统计学意义。 关键词 白假丝酵母菌；雌激素；HWP1 PAGE PAGE IV Abstract Background Vulvovaginal candidiasis(VVC) is a common disease of women. According to statistics, at least 75% of women suffer from the disease once in a lifetime. Recurrent vulvlvaginal candidiasis (RVVC) is one kind of vulvovaginal candidiasis which occurred four times or more a year. VVC is caused mainly by Candida albicans. Its pathogenic mechanisms include adhesion, beneficial enzymes and invasive phenotype conversion. Hyperplasia of Candida in vaginal is related to age, the effects of estrogen, pregnancy, disease susceptibility. It is clear that Candida albicans infection is often related to the existence of sex hormone. Ther