分化相关基因及维生素A对先天性肠无神经节细胞症的发病作用初探-儿科学(小儿外科)专业论文.docx

重庆医科大 重庆医科大学硕士研究生学位论文 万方数据 万方数据 英汉缩略语名词对照 英文缩写 ATRA cDNA 英文全称 all-trans retinoic acid complementary deoxyribonucleic acid 中文名称 全反式维甲酸 互补脱氧核糖核酸 DEPC diethyl pyrocarbonate 焦碳酸二乙酯 DNA deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸 EDNRB Endothelin Receptor type B 内皮素受体 B ENS Enteric nervous system 肠神经系统 GDNF Glial cell line-derived neurotrophic factor 胶质细胞源性神经营养因 子 h hour 小时 HD Hirschsprung’s disease 先天性肠无神经节细胞症 LncRNA long non-coding RNA 长链非编码 RNA min minute 分钟 mRNA messenger ribonucleic acid 信使核糖核酸 neural crest-derived stem NCSCs PAGE  cells Polyacrylamide gel electrophoresis 神经嵴干细胞 聚丙烯酰胺凝胶电泳 PVDF polyvinylidene fluoride 聚偏二氟乙烯 PBS phosphate buffered solution 磷酸盐缓冲液 RA Retinoic acid 维甲酸 rpm revolutions per minute 每分钟转数 sec second 秒 SDS sodium dodecyl sulfate 十二烷基磺酸钠 Tris trishydroxy methhylamino 三羧甲基氨基甲烷 1 TBST WS4 methane tris-buffered saline with tween-20 Shah-Waardenburg Syndrome Type 4  吐温-20-三羟甲基氨基甲 烷盐缓冲液 IV 型瓦尔顿堡综合征 2 分化相关基因及维生素 A 对先天性肠无神经节细胞症 的发病作用初探 摘 要 第一节 FOXA1、DUSP6 和 HA117 在先天性肠无神经节细胞 症的表达研究 目的：检测先天性肠无神经节细胞症（Hirschsprung’s Disease, HD） 患儿肠组织中 FOXA1、DUSP6 及长链非编码 RNA（Long Non-coding RNA, LncRNA）HA117 的表达特点，探讨其与 HD 发病机制的可能联 系。 方法：收取 34 例临床诊断为 HD 的患儿手术结肠组织标本，结肠 组织由近端至远端分为 3 组：吻合口组、扩张段组和痉挛段组。采用 Real-time PCR、免疫组织化学染色、Western Blot、统计学分析方法检 测 FOXA1、DUSP6 及 HA117 在各组结肠组织的表达水平。 结果：在吻合口组、扩张段组和痉挛段组，FOXA1 mRNA 相对表 达量依次为 6.703 ± 2.235、3.017 ± 0.848、1.432 ± 0.396，呈依次降低 趋势，其中，与吻合口相比，痉挛段表达量显著降低（P 0.05），具 有统计学意义；DUSP6 mRNA 的相对表达量分别为 2.694 ± 0.683、1.971 ± 0.385、1.113 ± 0.162，呈依次降低趋势，其中，与吻合口相比，痉挛 段表达量显著降低（P 0.05），具有统计学意义；HA117 RNA 的相对 表达量分别为 0.214 ± 0.049、0.807 ± 0.21、1.744 ± 0.565，呈依次增高 的趋势。其中，与吻合口相比，痉挛段表达量显著增高（P 0.05）， 3 具有统计学意义。在吻合口段的肌间神经丛，均可见 FOXA1 及 DUSP6 蛋白呈棕黄色的阳性染色，而在痉挛段几乎未见阳性染色。在 HD 的 吻合口、扩张段、痉挛段结肠组织中，FOXA1 蛋白的相对表达量分别 为 1.416 ± 0.153，0.830 ± 0.060，0.821 ± 0.072，其中，与吻合口相比， 扩张段与痉挛段表达量显著降低（P 0.05），具有统计学意义；DUSP6 蛋白的相对表达量分别为 1.187 ± 0.090，1.067 ± 0.113，0.809 ± 0.040， 其中，与吻合口相比，痉挛段表达量显著降低（P 0.05），具有统计 学意义。 结论：FOXA1 和 DUSP6 基因或能促进 ENS 的分化发育，并且二 者或为上下游关系，存在于 RET 信号通路中，FOXA1/DUS