《微波辅助提取青钱柳黄酮的工艺优化》-毕业论文（设计）.docVIP

微波辅助提取青钱柳黄酮的工艺优化 摘要：　利用微波辅助提取法(MAE) 提取青钱柳中的黄酮类化合物，通过4因素(包括溶剂、微波辐射时间、微波辐照温度和料液比) 5水平的二次回归正交旋转组合设计试验进行实验条件的优化，继以分光光度法测定提取液中的总黄酮含量。结果表明: 提取温度83℃，提取时间15min，固液比1：52，乙醇浓度60%时，青钱柳总黄酮浸出最多。结论:微波提取技术具有提取工艺简单,提取时间短，提取效率高等优点，较适合于实验室条件下使用，是一种适合提取青钱柳总黄酮的方法。 关键词：青钱柳 微波辅助提取 总黄酮 二次回归旋转组合设计 青钱柳Cyclocarya paliurus(Bata1.)Iljinskaja.胡桃科(Juglandaceae)植物，具有很多药用价值。用青钱柳叶炮制成的青钱柳茶具有生津止渴、清热解署、降压强心及延年益寿的作用，可有效地用于防治糖尿病、高血压、冠心病、神经衰弱等疾病。这与含有大量的黄酮类物质是分不开的。 传统的黄酮提取方法有浸渍法、索氏法、回流法等，这些方法加热时间长,溶媒耗量大。 微波辅助提取技术穿透力强、选择性高、加热效率高、提取时间短、溶剂用量少及提取效率高等优点,越来越受到科研工作者的重视。关于青钱柳中黄酮类化合物的微波提取方法的研究尚未见报道。 本项研究考察了微波提取条件(包括溶剂、微波辐射时间、提取温度和料液比) 对青钱柳中总黄酮提取率的影响,确定了最佳微波提取条件。以便更好地开发利用青钱柳叶这一丰富资源。 1 材料试剂与设备 样品来源：江西九江修水县；芦丁标准品（中国药品生物制品检定所）；其它试剂均为分析纯；实验用水由蒸馏水经纯化器纯化所得 MDS-2002A型微波消解/萃取仪（上海新仪微波化学科技有限公司）；UV-2000型紫外可见分光光度计（尤尼科上海仪器有限公司）；电子天平；SHZ—Ⅲ型循环真空泵（上海亚荣生化仪器厂）； 2 实验方法 2.1 提取方法 取青钱柳细粉(40目) 于60℃干燥4 h, 精密称量2g放入萃取罐中，加入萃取剂乙醇在MDS-2002AT型微波消解/萃取仪中进行萃取,萃取一段时间, 提尽黄酮。然后进行抽滤,留取上清液，滤渣用少量乙醇多次洗涤, 并入提取液中,定量转移入100mL 容量瓶中, 用乙醇定容, 摇匀, 即得测总黄酮的青钱柳样品液。 2.2总黄酮的测定 2.2.1工作曲线的绘制 精确吸取 0.112mg/mL 芦丁的标液0.0mL，0.5mL，1.0mL，1.5mL，2.0mL，2.5mL于6只10mL具塞试管中，加入1mL 1%的三氯化铝（甲醇液），摇匀，放置15 min，以零管为空白，于410 nm 波长下测定吸光度。以吸光度对标样含量微克数作图，以最小二乘法计算，得出其标准曲线A=0.0269C+0.0054，R2=0.9996，其线性范围为0～280ug。 表1 芦丁标准品标准曲线的描绘 序号 1 2 3 4 5 6 标准溶液（mL） 0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 芦丁含量（ug/mL） 0 5.6 11.2 16.8 22.4 28.0 吸光度A1 0 0.163 0.312 0.457 0.608 0.760 吸光度A2 0 0.163 0.309 0.466 0.598 0.770 吸光度A3 0 0.162 0.301 0.458 0.596 0.761 平均吸光度A 0 0.163 0.307 0.460 0.601 0.761 2.2.2 含量的测定 用移液管精确吸取样液0.5mL 于10mL 刻度具塞试管中，按照2.2.1 项操作, 显色 15min 后,在410nm 处测定吸光度值,以芦丁作参照物，由回归方程求出稀释液中总黄酮浓度, 然后计算青钱柳中总黄酮的含量。 3 结果与讨论 3.1 溶剂对提取率的影响 控制提取时间5min，提取温度80℃ ,料液比（g/mL）为1：20，用不同含量的乙醇溶液为提取液进行微波辅助提取,以2.2.2中方法测定各提取液中总黄酮的含量。实验结果表明:当乙醇含量为70 %时,微波提取效率最高。 乙醇浓度对提取率的影响 微波作用时间对提取率的影响 3.2微波作用时间对提取的影响 控制提取温度为80℃ ,固液比为1：20，以90%的乙醇溶液为提取液,进行不同时间的微波辅助提取, 以2.2.2中方法测定各提取液中总黄酮的含量。实验结果表明:黄酮提量随时间的推移是增大的，但是增加的趋势不是很明显，考虑经济因素，其它但因素采取时间为5min。 3.3 固液比对提取率的影响 以70%的乙醇溶液为提取液,再80℃下以不同的固液比进行微波辅助提取5min, 以2.