灯盏细辛提取物对高压状态下视网膜保护作用的基因调控研究-中医五官科学(眼科)专业论文.docx

中文摘要 目的：1．观察 DSX 对高压培养大鼠 RGCs 保护作用的基因调控。2．观察 DSX 对 持续性高眼压大鼠视网膜保护作用的基因调控。3．探讨 DSX 的视网膜保护机制。 方法：1．建立 4 小时 80mmHg 体外高压培养 RGCs 模型，利用基因芯片技术研究压 力对大鼠 RGCs 基因表达的影响。2．在高压培养 RGCs 中加入 DSX 进行干预，利用基 因芯片技术，观察 DSX 对 RGCs 基因表达的调控。3．采用 Akira 法，建立持续性高眼压 大鼠模型，利用基因芯片技术研究持续性高眼压对大鼠视网膜基因表达的影响。4．用 DSX 灌胃持续性高眼压大鼠 1 月，利用基因芯片技术，观察 DSX 对高眼压大鼠视网膜基 因表达的调控。 结果：1．模型组和空白组 RGCs 有差异表达基因 108 条，其中凋亡基因 NGFR、PAWR、 S100B、ESTs 和细胞骨架蛋白基因表达上调，表达下调的基因主要涉及神经系统发育、神 经冲动传导、突触传递、离子通道性能、神经生理过程、细胞间信号转导、细胞黏附与 细胞外基质等功能基因。2．RGCsDSX 组和模型组差异表达基因 51 条，其中凋亡抑制基 因 Bcl2a1 和 Spp1 上调，凋亡基因 NGFR 下调，4 条外部生理刺激调控基因上调，3 条 ATPase 活性基因上调；3．RGCs 阳性对照组和模型组差异表达基因 41 条，其中凋亡基 因 S100B 和 NGFR 表达下调，凋亡抑制基因 Hmox1 上调；4．模型组和空白组差异表达 基因 22 条，其中凋亡基因 NGFR 上调，CRYBB1 下调；5．DSX 组和模型组差异表达基 因 17 条，其中凋亡基因 NGFR 表达下调，CRYBB3、CRYGD、CRYBB2 表达上调。 结论：1．高压导致谷氨酸代谢转运相关基因下调，谷氨酸代谢转运功能紊乱，造成 细胞外Glu堆积，从而促进Ca2+内流，细胞内Ca2+超载，引发细胞信号转导系统的级联反 应，上调凋亡基因的表达使RGCs凋亡。2．DSX可提高RGCs对外界刺激的反应，改善能 量代谢，清除Glu，减轻Ca2+内流，避免细胞内Ca2+超载，阻断细胞内信号转导途径，使 凋亡基因NGFR表达下调。3．DSX能上调凋亡抑制基因Bcl2a1和SPP1的表达，上调对RGCs 有保护作用的晶体蛋白相关基因的表达从而保护视网膜。4．DSX对视网膜的保护作用靶 点多、机制复杂，其保护作用可能是凋亡抑制基因与凋亡基因，在高眼压等病理状态下 的拮抗与协同作用的结果。 关键词：RGCs；视神经保护；基因芯片；高眼压模型；凋亡基因 ABSTRACT Objective: 1. To observe the protection of DSX on gene regulation of rat RGCs cultured in vitro with high pressure. 2. To observe the protection of DSX on gene regulation of the rat retinal with chronic, moderately elevated intr aocular pressure (IOP). 3. Analyze the mechanism of protection of DSX for rat retina. Method: Setting up RGCs high pressure model cultured in vitro with the condition of 80mmHg for 4 hours, then using gene array technology to study the regulation of gene express of rat RGCs on the variation of pressure. 2. Adding DSX into RGCs cultured with high pressure, then using gene array technology to observe the effect of DSX on the regulation the gene express of rat RGCs. 3. Building the model of chronicity, moderately elevated intraocular pressure by the method of Akira’s, then using gene array technology to study the regulation to gene express of rat reti