隔绝淋巴引流在同种异体复合组织移植中的作用及作用机制研究-外科学专业论文.docxVIP

硕 硕 士 学 位 论 文 - - MHC Major histocompatibility complex 主要组织相容性复合 体 MMF Mycophenolate mofetil 霉酚酸酯 OKT3 Ortho Kung T-cell （ monoclonal antibody）  抗 CD3 单克隆抗体 PTLD Post-transplantation lymphoproliferative disorder  移植后淋巴组织增生 性疾病 TCR T cell receptor T 细胞受体 隔绝淋巴引流在异体复合组织 移植中的作用及作用机制研究 中文摘要 研究背景 在器官移植取得成功后的 50 年里，复合组织移植进展一直十分缓慢， 导致这一现象的原因被归结为皮肤的强抗原性和缺少有效的免疫抑制手段， 成为了复合组织移植不可逾越的障碍。随着新型免疫抑制剂的发现与应用 以及显微外科技术的成熟，同种异体复合组织移植在整形与重建外科领域 近年来获得了突破，但是限制其发展的瓶颈仍旧是免疫抑制剂全身长期应 用所带来的毒副作用[1,2] ，如何减少免疫抑制剂全身用药剂量是目前该领域 研究的热点。在异体皮肤及角膜的移植研究中发现引流淋巴结对于排斥反 应至关重要，对切除引流淋巴结的豚鼠进行相应引流部位的异体皮肤移植 后，异体皮肤存活时间延长[3]，角膜的 Langerhans 等骨髓来源的细胞[4，5] 在移植后，可以迁移至局部引流淋巴结，提呈角膜的异体抗原，引发免疫 排斥反应[6]，因此阻断复合组织移植物皮肤淋巴管网与受体相接触，一方面 能有效的切断抗原提呈细胞和活化 T 细胞通过淋巴管输入引流淋巴结中， 另一方面也阻断了受体效应 T 细胞通过淋巴管进入移植物中，从而可以延 长移植物的存活时间。本实验试图建立大鼠下腹部异体复合组织淋巴引流 隔绝模型，并尝试延长移植物的存活时间。 - - 硕 士 学 位 论 文 目的 1. 建立隔绝淋巴引流的大鼠实验模型 2. 验证淋巴引流是否是启动免疫排斥的主要途径 方法 实验一 （1）大鼠腹股沟部解剖，熟悉局部解剖结构（2）通过对 比橡皮垫隔离模型、塑料管隔离模型、塑料托盘加铁丝网固定模型的优缺 点确定实验隔离模型。实验二 （1）利用实验一确定的游离移植皮瓣和 隔绝淋巴引流的大鼠实验模型通过显微外科血管吻合进行大鼠的自体游离 皮瓣移植，移植皮瓣分为三组，分别为游离皮瓣组（供区皮瓣直接与受区 缝合无隔离）、皮管组（将供体皮瓣卷制为管状与受区缝合）、隔离组（实 验一建立大鼠隔离模型）。术后观察皮瓣血供情况，摸索术后固定及取材方 法。（2）通过 SD 大鼠异体游离皮瓣及皮管的移植，建立大鼠复合组织移植 淋巴引流隔绝模型。7-8 周龄雄性 SD 大鼠切取下腹部皮瓣并游离行同种异 体移植，皮肤淋巴隔离组（A 组）：将供体皮瓣边缘对合、缝合成管状，底 边留血管蒂出口用隔离器隔离，显微外科吻合血管，皮管缝合于隔离器， 隔离器固定于受体；单纯皮管组（B 组）：将供体游离皮瓣卷制成管状，显 微外科吻合血管并将皮管直接缝合于受体；C 组空白对照组（C 组）：行游 离皮瓣异体移植，大体观察每组皮瓣及皮管存活时间，于术后 3、5、7、14、 28、35d 取移植物皮肤组织行 HE 染色,观察病理学变化。 结果 实验一 经对大鼠背部皮瓣、颜面部皮瓣、下腹部皮瓣及侧胸皮瓣 的解剖和移植对比,下腹部皮瓣具有解剖结构清楚、供应血管适合显微缝合、 术后观察及取材较为简便等优点，故选为本实验移植皮瓣。通过对橡皮垫 隔离、塑料管隔离和塑料托盘加铁丝网固定三种隔离模型的对比，塑料托 盘加铁丝网固定模型在术后固定及隔离效果方面明显优于其他两种模型， 硕 硕 士 学 位 论 文 故选为实验隔离模型。实验二 三组不同移植形式的大鼠自体下腹部游离 皮瓣均满意成活，隔绝淋巴引流的大鼠实验模型建立成功。SD 大鼠异体皮 瓣移植 A 组（隔离组）：皮管存活时间为 32（34，32）天；B 组（皮管组）： 皮管存活时间为 15（16,15）天；C 组（对照组）：皮瓣存活时间为 6（7,6） 天。A 组与 C 组、B 组与 C 组、A 组与 B 组存活率差异均有统计学意义（P ＜0.05）。 结论 本实验成功建立了大鼠的复合组织移植淋巴引流隔绝模型,并证实了 此模型能有效延长移植物存活时间。 关键词 游离皮瓣；复合组织异体移植；免疫抑制；动物模型 Effect of insulated draining lymph in composite tissue allograft-transplantation Abstract Background In the following fifty years