蛋白质组学技术分析妊娠期高血压孕妇尿液分子标记物的分析-妇产科专业论文.docxVIP

摘要 摘 要 广州医学 广州医学院硕士学位论文 PAGE PAGE 13 PAGE PAGE 10 蛋白质组学技术分析妊娠期高血压孕妇 尿液分子标记物的研究 硕士研究生： 胡金艳 指导教师： 王晨虹 教 授 摘 要 一、研究背景 1.妊娠期高血压 妊 娠 期 高 血 压 （ Gestational hypertension ） 是 妊 娠 期 高 血 压 疾 病 (hypertensive disorder complicating pregnancy)的一种,是妊娠期特有的以 血压升高为主要临床特征的一种疾病,单纯而严重的妊娠期高血压孕妇,虽无蛋 白尿,母儿患病率较高,甚至高于轻度子痫前期患者[1]。临床上约 25%～50%最开 始诊断为妊娠期高血压者,可以进展为子痫前期-子痫,并且妊娠期高血压的发 病越早,其进展为子痫前期-子痫的可能性越大, 可导致孕产妇脑血管意外、子 痫、围产儿早产、甚至死亡等不良妊娠结局,其对孕产妇及围产儿造成的危害日 益受到人们的认识和关注；在我国,妊娠期高血压疾病是导致孕产妇及新生儿死 亡的主要原因之一,严重危害母婴健康[2]。近年来, 国内外学者通过免疫、基因 等方面的研究, 对妊娠期高血压疾病的某些发病因素有所了解, 但其发病机理 仍未全面阐明，也缺乏有效、全面的特异性检测指标和方法,用于预防、早期筛 查该疾病,以及预测其严重程度[3,4]。因此寻求妊娠期高血压疾病特异性的分子标 记物,进一步阐明其发病机制,实现早期诊断及预测妊娠期高血压疾病是近年来 产科研究的热点。 2.蛋白质组学研究方法 蛋白质组学是以一个细胞、组织或体液中,全部表达的蛋白质为研究对象； 是当前生命科学研究中的前沿领域,是实现机体蛋白质的全面、快速、准确的鉴 定研究中必不可少的关键性技术之一。机体内细胞或组织等内的蛋白质组细微 的变化,就可以引起机体内某些重要通路的抑制或激活,进而可能导致细胞的变 异或者分裂,蛋白质组作为机体一个高度动态的系统,蛋白质丰度的变化,是许 多诸如心血管疾病、癌症等疾病发病过程中的重要标志,研究病变细胞相对于机 体正常细胞中蛋白质表达丰度的变化,发现疾病相关的生物标志物对实现疾病 的早期诊断及早期预测,具有十分重要的意义[5]。应用蛋白质组学在临床方面, 可以研究特异蛋白质与疾病的关系,从而找到疾病的标记蛋白,为临床提供新的 诊断依据[6]。蛋白质组学的特点是采用高通量的蛋白质鉴定技术,结合高分辨率 的蛋白质分离技术, 全面地研究在生理及病理等各种特定情况下,机体动态表 达的全部蛋白质的整体变化。 3.蛋白质组学在临床中的应用 蛋白质组学技术的应用,在临床领域中还仅仅局限于筛选疾病相关的特异 性标志物。蛋白质组学研究中应用最多是在肿瘤相关方面, 蛋白质组学不仅为 其提供了一个新的方法以研究肿瘤的发病机制,而且利用蛋白质质谱可以进行 肿瘤的早期诊断及判断患者的预后, 判断有些特异体质的患者治疗后的机体反 应, 用于判断机体的耐药性。另外, 蛋白质组学也较多的应用于新药开发中。 通过比较正常细胞与疾病细胞中的蛋白质组, 寻找一些疾病相关的蛋白质, 并 将这些蛋白质作为疾病诊断的的关键点。国内研究学者[7]应用蛋白质组学方法, 分析正常4例人尿液蛋白质组成成分,初步建立了正常人尿液的蛋白质图谱,为 分析病理情况下尿液蛋白质成分的改变提供了基础资料,为今后研究病理情况 与生理情况下尿液蛋白质组的差异提供依据。俞丽丽等[8]运用蛋白质组学的方法, 建立了妊娠期高血压疾病与正常妊娠孕妇的血清蛋白质谱图,进一步比较两组, 发现二者之间存在差异的5个质荷比相对应蛋白质,这5个质荷比相对应的蛋白 质有可能成为早期筛查妊娠期高血压疾病的血清学标志物。国外研究者[9]利用蛋 白质组学技术建立了检测早期卵巢癌的血清蛋白质图谱；国外学者[10]筛选了葡 萄胎组织的蛋白质图谱, 发现3种金属结合多肽的表达量明显少于对照组。研究 也发现[11] 在胎膜早破患者血清蛋白质图谱中,发现了两种未知功能的蛋白质, 认为这两种未知蛋白质可能是胎膜早破诊断的特异性生物标志物。 4.基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 在蛋白质组学研究中,生物质谱已成为蛋白组大规模分析的强有力工具,是 近年来新兴的一种技术,应用日益广泛。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱是 近年来发展起来的,新型的软电离生物质谱的一种,主要由基质辅助激光解吸电 离离子源（MALDI）及飞行时间质量分析器（TOF）两部分组成。MALDI-TOF-MS 具有特异度高、灵敏度高及分辨率高等特点。国内外众多研究者,应用基质辅助 激光解吸电离飞行时间质谱技术,发现了许多对疾病诊断、治疗以及预后有重要 作用的疾病标志物[12-15]。为生命科学等领域提供了一种强有力的分析测试