氮杂大环稀土金属配合物作为人工核酸酶的研究-生物医学工程专业论文.docx

摘要 摘要 I万方数据 I 万方数据 摘要 摘要 重庆理 重庆理工大学硕士学位论文 I万方数据 I 万方数据 II万方数据 II 万方数据 摘要 人工核酸酶在新型限制性内切酶及抗癌药物方面具有非常诱人的前景，因此开 发能够高效特异性切割核酸的人工合成试剂成为当前科研领域研究的热点之一。近几 年在研究有机小分子与核酸的相互作用和对DNA催化裂解方向取得了很大进步，但 报道的大部分的断裂剂是过渡金属配合物，大多是通过氧化还原机理催化DNA裂解。 由于在氧化还原过程中它们导致自由基的生成和碱基与脱氧核糖的破坏，因此限制了 它们的药学使用。 近年来，在研究核酸水解断裂的化学模拟方面人们已经取得了很大进展。大环 类化合物与生命体内的大环化合物的基本结构单元相似，合成这类化合物并对它们的 结构和性质进一步的研究将有助于揭示生命体内部化学反应的规律，因此大环类金属 配合物在化学、生物和医学领域中具有广泛的应用前景。与此同时，稀土及其配合物 作为人工核酸酶的研究越来越受到人们的重视，因为它们能高效地促进DNA中的磷 酸二酯键水解，同时不会导致碱基和脱氧核糖的破坏。 为了获得高效的人工（或者化学）核酸酶体系，本文研究了三种氮杂大环配体与 铈、镧离子构成的配合物作为人工核酸酶对核酸及其模型物BNPP的催化活性和水解 裂解机理。 通过紫外分光光度法研究了饱和氮杂大环(L1)、不饱氮杂大环(L2)和具有羧基侧 臂的氮杂大环(L3)配体与铈、镧离子构成的配合物作为人工核酸酶对核酸模型物 BNPP 的催化水解作用，并根据光谱分析和动力学研究结果提出了催化反应机理。研 究表明，在适当的酸度和温度条件下，催化体系表现出较高的催化活性和稳定性，催 化活性物质是配体与金属离子形成的金属配合物。在相同条件下，氮杂大环铈配合物 较镧配合物对 BNPP 水解的催化效率更高。 在研究氮杂大环镧系金属配合物催化 BNPP 水解机理的基础上，通过紫外-可见 吸收光谱法、荧光光谱法和电化学方法研究了氮杂大环金属配合物 CeL1，LaL1，CeL2， LaL2，与 DNA 相互作用的结合模式。研究表明，氮杂大环稀土金属配合物是通过与 DNA 双螺旋结构外侧的磷酸结合发生相互作用。同时使用凝胶电泳法研究了它们对 DNA 的水解切割作用。研究结果表明，LnL1 与 DNA 结合作用最强，切割 DNA 效率 最高，LnL2,次之，LnL3 几乎没有切割作用。由此可见，配体的结构对与 DNA 结合 性和切割作用具有重要的影响力。 综上所述，杂氮大环稀土金属配合物能有效水解断裂DNA模型化合物和DNA， 是有效的人工核酸酶体系。进一步设计和合成具有特定结构的杂氮环镧系金属配合 物，研究其催化活性及其催化机理，是人工核酸酶研究中值得进一步探索的方向。 关键词：人工核酸酶 ；氮杂大环稀土金属配合物；催化；磷酸二酯水解；DNA切割 Abstract At present,site-specific cleavage of DNA with high efficiency has attracted many researchers since artificial nucleases have potential application as novel restriction enzymes and anticancer therapeutic agents. In the past few years, the studies of the interaction between small organic molecules and nucleic acid have made great progress. Most reported cleavers are transition metal complexes, which break down DNA by redox reaction.However,their pharmic use is hampered because of the free-radical generation and the damage of bases and deoxyriboses during redox processes. In recent years,many research groups had obtained some satisfied results on the study of the phosphate easters hydrolysis catalyzed by the artifical enzyme.Macrocyclic ligand complexes are involved in a number o