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肝细胞高胆固醇负荷激活UPR介导炎症因子表达上调的研究-生物化学与分子生物学专业论文
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华中科技大学硕 士 学位论文
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mRNA messenger RNA 信使 RNA
NC nitrocellulose 醋酸纤维膜
NAFL non-alcoholic fatty liver 非酒精性单纯性脂肪肝 NASH non-alcoholic steatohepatitis 非酒精性脂肪性肝炎 NAFLD non-alcoholic fatty liver diseases 非酒精性脂肪性肝病 PBA 4-Phenylbutyric acid 4-苯丁酸
PBS phosphate-buffered saline 磷酸缓冲液
PCR polymerase chain reaction 聚合酶链反应
PERK PKR-like ER kinase PKR 样内质网激酶
RT-PCR reverse transcription-polymerase
chain reaction
逆转录-聚合酶链反应
SAP serum amyloid P-component 血清淀粉样 P 物质
SDS SDS polyacrylamide gel SDS-多聚丙烯酰胺胶
SREBP2 sterol regulatory element-binding
protein 2
固醇调节元件结合蛋白 2
TEMED tetramethylethylenediamine 四甲基二乙胺
TNF-α tumour necrosis factor-α 肿瘤坏死因子 α UPR unfolded protein response 未折叠蛋白反应 XBP1 x-box binding protein–1 X 盒结合蛋白 1
肝细胞高胆固醇负荷激活未折叠蛋白反应介导炎症因子 表达上调的机制研究
中文摘要
目的:观察高胆固醇负荷的肝细胞炎性表达变化并探讨引起肝细胞炎性因子 表达调节的可能机制。
方法:以 L02 肝细胞为研究对象,设置胆固醇阴性对照组、高胆固醇负荷 组,采用 Real-time PCR 法和 Western Blot 等方法观察检测细胞未折叠蛋白应答
(unfolded protein response, UPR)的活化状态及炎性相关因子 IL-6、IL-1β、TNF- α、CREBH 等的表达变化;同时使用 UPR 抑制剂 PBA 分析高胆固醇负荷下 UPR 的活化与炎性表达变化的相关性。
结果:Real-time PCR 和 Western Blot 显示高胆固醇负荷可活化 UPR 反应并 上调炎性因子表达;在 PBA 存在时 UPR 活化受抑制,同时 IL-6、IL-1β、TNF- α、CREBH 等炎性因子的 mRNA 表达相较于未加 PBA 的高胆固醇负荷组均有 明显下调;单独使用 PBA 孵育细胞 UPR 及炎性表达与阴性对照一致。
结论:高胆固醇负荷时可能通过活化 UPR 信号途径介导炎性相关因子的表 达调节。
关键词:肝细胞;胆固醇;炎性因子;未折叠蛋白应答
Cholester ol over loading leads to upr egulatting of inflammator y-r elated factor s in hepatic L02 cell through
activation of the unfolded protein r esponse
ABSTRACT
Objective: The effect of overloading cholesterol to the expression of inflammatory factors in L02 hepatic cell was observed, and the perhaps mechanism of inflammatory factors expression due to cholesterol was investigated.
Methed: L02 hepatic cell was incubated with certain concentration cholesterol for several hours, the expressions of some inflammatory factors, such
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