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采用正交设计优化白芨组织培养快繁体系 :微繁技术是白芨种苗大规模生产的一种主要途径。本文以1/2MS、 MS和MS+马铃薯汁三种为基本培养基，结合NAA和6-BA两种植物激素， 采用正交设计实验法研究不同浓度配比对白芨原球茎诱导的影响。结果表 明：对白发原球葢诱导最适培养基为MS +马铃薯汁NAA (O.lmg/L) +6-BA (lmg/L)，以期捉高白芨组织培养的效率，为其快繁及大规模工厂化生产 提供依据。 关键词：白芨；组培快繁；植物激素；正交设计；原球茎诱导 The cultivation of micropropagation system optimization design of Bletilla tissue orthogonal CHENG Xiaojingl, ZHOU Liyingl,ZHOU Chuqil ,BU Lulul, YANG Zhenganl* (l.Yunnan Agricultural University,Kunming 650201) Abstract:Micropropagation technique is a main way to produce large scale of Bletilla striata seedlings. In this paper, we took 1/2MS, MS and MS with potato juice as three kinds of basic mediums, adding with different concentrations of two kinds of plant hormones named NAA and 6-BA.In this test,we used orthogonal experimental method to research the effects of different concentration on protocorm of Bletilla striata, which is made to determine the optimum medium for Induction of protocorm of Bletilla striata. The results show that: the optimum medium is MS + potato juic + NAA (O.lmg/L) + 6-BA (lmg/L), which improves the efficiency of Bletilla tissue culture, propagation and provides the base on rapid propagation and large-scale production. Keywords： Bletilla striata; Micropropagation; Orthogonal design 1引言 白发(Bletiua striata (Thunb.) Reichb.f.)属兰科白茨属植物,有较高 的观赏价值，深受人们喜爱［1］。白芨块茎可入药、具有消肿生肌的功能， 在临床上使用较多［2］。但白芨的种子微小，无胚乳发芽所需养分，在自然 状态下极少萌发成苗。传统的人工栽培通常采用分株繁殖，其繁殖效率较 低，周期长［3］。冃前关于白芨组织培养的报道极少［4］。其繁殖速度快, 周期短，管理方便等优点的植物组织培养技术是白芨快速繁殖方法的重要 选择。采用正交设计法可用最少的处理组合数研宂较多的试验因素，在农 业研究中广泛应用［5］。使用正交设计可以用较少的实验次数获得较多的 信息，以达到精简实验次数结果［6］。 正交设计在组织培养研究中应用的报道不多 ［7-8］ ,它不仅可以通过分析实验结果选择最佳的 培养条件，还可以揭示各因素对培养效果作用的相对大小。 本文试验选用白芨无菌原球茎为外植体，在1/2MS、MS、MS+马铃薯 汁三种基本培养基屮附加了不同浓度的NAA和BA,采用正交试验设计进 行了原球茎的诱导试验，旨在确定白芨丛生芽诱导的最佳培养基，以期提 高白芨组织培养的效率。为其快繁及大规模工厂化生产提供依据。 2材料和方法 2.1供试材料 材料采自云南农业大学园艺系实验室内白芨苗，取其原球茎作为样品。 2.2方法 2.2.1外植体的选择 本次试验选用无菌白芨原球茎作为外植体 [9] ，将原球茎用刀片切分为四小块，分别接 种到九种不同的培养基上，每个处理3次重复，每次重复接种5个外植 体，共接种27瓶。培养温度(25± 2)°C，光照强度2500LX,光照时间12h/d, 培养25d进行出芽率的统计，并转接到继代培养基上进行继代培养。 2.2.2正