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peg化可降解pei-et的构建、筛选与smad3基因输送分析
上海交通大学医学院硕士论文
delivery in vivo.
KEY WORDS:non-viral gene vector, PEG-Et, rabbit aortic smooth muscle
cells, Smad3 gene, cytotoxicity, transfection efficiency
V
上海交通大学医学院硕士论文
目 录
摘 要 I
ABSTRACT III
缩略词表 1
前 言2
1.1 血管损伤2
1.1.1 转化生长因子 （TGF-β）2
1.1.2 Smad3 基因3
1.2 基因输送4
1.2.1 非病毒载体的分类4
1.2.2 聚乙烯亚胺 （PEI ）类聚阳离子入胞原理 5
1.2.3 可降解PEI 类基因载体研究状况 5
第一部分 PEG 修饰的可降解的PEG-Et 的构建及筛选 10
1.1 PEG-Et 等聚合物的合成与表征10
1.1.1 仪器和材料10
1.1.2 PEG-Et 等聚合物的合成 11
1.1.3 四种阳离子聚合物的表征12
1.1.4 阳离子聚合物的表征结果13
上海交通大学医学院硕士论文
1.1.5 实验讨论14
1.2 PEG-Et 与DNA 复合物的制备和表征15
1.2.1 仪器与材料16
1.2.2 实验方法17
1.2.3 实验结果19
1.2.4 实验讨论22
1.3 四种阳离子聚合物的体外转染和细胞毒性23
1.3.1 仪器与材料23
1.3.2 实验方法24
1.3.3 实验结果30
1.3.4 实验讨论36
第二部分Smad3 基因与VSMC 增殖关系的初步研究39
2.1 PEG-Et 1:1 与shSmad3 基因复合物的制备和表征 39
2.1.1 仪器与材料39
2.1.2 实验方法40
2.1.3 实验结果42
2.1.4 实验讨论45
2.2 体外转染和细胞毒性45
2.2.1 仪器与材料46
上海交通大学医学院硕士论文
2.2.2 实验方法47
2.2.3 实验结果54
2.2.4 实验讨论58
参考文献 61
致 谢 65
攻读学位期间发表和录用的论文、专利66
上海交通大学医学院硕士论文
缩略词表
英文简称 英文全称 中文全称
PEI Polyethyleneimine 聚乙烯亚胺
PEI-Et PEI derivative with ethylene biscarbamate 氨酯键交联聚乙烯亚
linkage 胺衍生物
PEG-Et Poly(ethylene glycol)-PEI-Et 聚乙二醇化PEI-Et
1H-NMR Proton Nuclear Magnetic Resonance 核磁共振
GPC Gel Permeation Chromatography 凝胶渗透色谱法
TEM Transmission Electron Microscope 透射电子显微镜
OD Optical Density
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