破瘀散结法诱导体外培养的食管癌ec9706细胞凋亡的实验分析.pdfVIP

山东中医药大学2005届碰士学位论文 3结果 3．1形态学观察分析 3．1．1倒置显微镜观察活细胞 正常EC9706细胞呈上皮型，贴壁生长，生长状态良好的细胞充分伸展，透亮度 好。加入中药后，若浓度较高，在10一12h即可见到死亡的细胞。表现为细胞皱缩， 折光性不好，与周围的细胞分离、漂浮，形态不规则或呈圆形，细胞内部结构不清楚 (见图1)。在消化收集药物作用后的细胞时，发现一些仍贴壁无明显死亡特征的细 胞与空白对照组细胞相比，其回缩状态不良，尤其在药物浓度较高时。 3．1．2透射电镜现察结果 参照文献【51记载观察到：未处理的对照细胞形态规则，表面有细小的微绒毛，核 仁明显，核染色质匀细。发生凋亡的细胞外形不规则，有多个大小不等的圆形或半圆 形突起物，内含排列密集的细胞器，细胞表面的微绒毛减少或消失，细胞核崩解成碎 块，形成凋亡小体。一些无明显凋亡特征的细胞表面，可见到不规则的微绒毛，或细 长或粗大，分布不均。(觅图2—7) 3．2流式细胞仪分析 EC9706细胞株经含不同浓度食管癌l号培养48h后，在DNA直方图上可见细胞 h凋亡率分别为 凋亡峰(AP峰)：浓度为