药物遗传毒性研究技术指导原则的修订.docVIP

药物遗传毒性研究技术指导原则的修订 毒理学杂志2007年8月第2l卷第4期JToxicolAugust2007Vo1.21No.4?279? 传毒性(致癌性)时,考虑人类与啮齿类动物在代谢上存在差异 也是很重要的.因此,使用来源于人的s9或者使用人的肝细 胞进行试验也许是更有效的.有报道表明,认为具有强致癌作 用的苯并芘,在使用人肝脏S9的试验中只表现有弱的遗传毒 性,而一部分芳香胺则对人s9表现出很强的反应性. 本次会议上拟报告的内容为,与评价及预测遗传毒性密切 相关的代谢活化及遗传毒性研究.此外,对ICH会议上关于遗 传毒性guideline的最新动向及相关焦点进行讲述. 遗传毒理学的若干进展 张天宝 (第二军医大学毒理学教研室,上海20o433) 中图分类号:Q355文献标识码:A文章编号:1002— 3127(2007)04—0279—0l 关键词:遗传毒性;致突变性;检测评价 l遗传毒理学相关概念的再认识 1.1遗传毒性与致突变性广义的遗传毒性(Genetictoxicity 或Genotoxicity)是指由遗传毒物引起生物细胞基因组分子结构 特异改变或使遗传信息发生变化的有害效应.因此,通过DNA 损伤产生突变以及基因组复制(replicationofgenome)过程误差 率增高皆为遗传毒性的表现.遗传毒性可分为DNA损伤,基 因突变,染色体结构改变和染色体数目改变四类.狭义的遗传 毒性是指对DNA或染色体的损伤,与DNA的相互作用. 致突变性(Mutagenicity)对DNA或染色体结构(或数目)的 损伤并能传递给子细胞的作用.致突变损伤的类型包括点突 变,缺失,易位,重组,基因转变(转换),扩增和非整倍性.致突 变物是指可引起宿主遗传序列改变的化学物.致断裂剂是指 可引起染色体正常结构改变的物质. 1.2遗传毒性与表现突变(epimutation)环境化学性及物理性 等因素可以通过基因组的可遗传的变异产生潜在的危害,导致 可遗传的表型改变,以往认为这是突变的后果.然而,突变并 不是基因组可遗传变异的唯一机制.环境物质也可直接或间 接改变甲基化模式和表遗传状态,导致功能基因表达改变,引 起表型的改变.酶基因或差异甲基化CpG岛结合蛋白CTCF基 因的突变或表观突变. 2遗传毒性机制的研究 2.1目前从基因组水平对遗传毒性反应的认识 2.2DNA损伤修复机制近年来,在DNA损伤修复机制及其 后果方面取得一些重要进展.从应用角度需注意的是碱基切 除修复(Baseexcisionrepair,BEn)主要针对由内源性因子引起 的一些常见的修饰;核苷酸切除修复(Nueleotideexcisionrepair, NER)~IIJ主要针对由环境诱变剂引起的螺旋变形性损伤的修 复;更为复杂的和不常见得DNA损伤则只能由一些看来十分 粗糙而易发生差错的过程来处理.在紧急情况下,细胞有时应 用特定的可通过损伤阅读的DNA聚合酶,但这就经常要冒插 入不正确碱基的风险. 3遗传毒性检测方法 3.1建立了一些新的测试方法如在检测生殖细胞突变上, 在传统的显性致死试验,特异位点试验和可遗传易位试验的基 础上新提出了扩展的简单串联重复(theexpandedsimpletandem repeat,ESTR)突变试验和转基因啮齿动物(transgenicrodent, TGR)突变试验;在检测体细胞突变上,发展了流式细胞仪检测 微核和扩展的简单串联重复突变,体外微核等. 3.2高通量早期检测方法如微型Ames试验(111emini—Ames assay),AmesIITM(致突变试验,利用发光菌的致突变试验 (MutagenicityAssayUsingLight—emittingBacteria),慧星试验等. 3.3基因芯片等检测方法 4遗传毒性的检测,评价 遗传毒性测试或评价要回答的一个关键问题是受试物是 否是一致突变物.证明一个物质是致突变物比证明一个物质 是遗传毒物更有意义. DNA加合物分析,DNA链断裂,非程序DNA合成,姐妹染 色单体交换这些试验是检测遗传毒性而非致突变性,其目的是 测试受试物是否有能力到达DNA或染色体部位并与其相互作 用,因而在体内试验阳性比在体外试验阳性更有意义.同样, 染色体畸变分析和微核分析也是检测遗传毒性而非致突变性, 体内试验阳性比在体外试验阳性更有意义,但体内试验阴性并 不能否定体外试验阳性. 分析发现市场上用体外哺乳动物细胞突变和,染色体损伤 试验阳性的大多数药物其致癌性资料呈阴性;有研究发现遗传 毒性可以通过非DNA反应机制的细胞毒性而出现.如何解释 体外遗传毒性试验结果和评估其危险度是目前面临的一个挑 战. 药物遗传毒性研究技术指导原则的修订 黄芳华,王庆利 (国家食品药品监督管理