血清总胆汁酸TBA测定试剂盒使用说明书-绍兴创烨生物科技有限.PDF

上虞市创烨生物有限公司 地址：浙江省上虞市高新技术产业园区鸿天工业园 电话：0575 传真：0575 网址： 邮箱：sales@ 血清总胆汁酸（TBA）测定试剂盒使用说明书 【简介】 用于全自动生化分析仪测定人体血清总胆汁酸含量。 胆汁酸的生成和代谢与肝脏有十分密切的关系，血清胆汁酸水平是反映肝脏实质损伤的一个重要指标。急 性肝炎 TBA 显著增高，可达正常水平的 10~100 倍。TBA 水平超过 20 umol/L 可能为慢性肝炎。肝硬化、 乙醇性肝病、中毒性肝病、胆汁淤积等，血清TBA 水平都会增高。而当回肠机能有障碍时，血清中胆汁酸 含量会下降。 【测定方法】 第五代循环酶速率法 【测定原理】 血清中胆汁酸根据 3ą-羟类固醇脱氢酶（3ą-HSD ）及 ß –硫烟酰胺腺苷二核苷酸氧化型（Thio-NAD ）被氧 化，生成 3-酮类固醇 ß –硫烟酰胺腺苷二核苷酸还原型（Thio-NADH ），生成的3-酮类固醇在 3ą-HSD 及 ß – 硫烟酰胺腺苷二核苷酸还原型（NADH ）的作用下，生成胆汁酸及ß –硫烟酰胺腺苷二核苷酸氧化型（NAD ）。 通过酶的循环反应，微量的胆汁酸被扩增，通过测定生成的 Thio-NADH 吸光度的变化而求得血清中胆汁酸 的浓度。 【试剂盒组成】 规 格 组 份 浓 度 液体双试剂， 试剂 缓冲液、THIO-NAD、3 α-HSD、NADH 适量 试剂Ⅰ：试剂Ⅱ=3 ：1 TBA 校准品 液体 甘氨胆酸钠、稳定剂 50 μmol/L 【样本要求】 不溶血血清或血浆。样本中的胆汁酸在2～8℃条件下可保存一周，-20℃条件下可保存三个月。 【测定步骤】 1.本试剂为液体双试剂，可直接使用。 2.测定参数：波长：405nm ；光径：10mm；温度：37℃。 3.测定方法： 加入物 空白管 校准管 测定管 试剂Ⅰ 270 270 270 蒸馏水(uL) 4 - - 标准液(uL) - 4 - 样本(uL) - - 4 混匀，置 37℃孵育 5 分钟 试剂Ⅱ(uL) 90 90 90 混匀，置 37℃延滞 1 分钟后读取各管吸光度，每隔 1 分钟读 1 次，共读 3 分钟，计算平均每分钟吸光度 变化率ΔA/min 4.上机参数： 温 度 37℃ 延迟时间 60 秒 样本量 4uL 主 波 长 405nm 试剂Ⅰ 270uL 副 波 长 660nm 试剂Ⅱ 90uL 读数时间 180 秒 1 上虞市创烨生物有限公司 地址：浙江省上虞市高新技术产业园区鸿天工业园