油菜BnROP1同源基因沉默导致拟南芥雄性不育.PDFVIP

2011年 2月 中国油料作物学报 2011，33(1)：001—008 Chinesejournalofoilcropsciences 油菜BnROP1同源基因沉默导致拟南芥雄性不育 王琢玉 ，李振波 一，阳永学 ，黄军艳 ，董彩华h，刘胜毅 (1．中国农业科学院油料作物研究所，农业部油料作物生物学重点开放实验室，湖北 武汉 430062； 2．中南民族大学生命科学院，湖北 武汉 430074) 摘要：基于油菜杂合双显性雄性核不育系和拟南芥全基因组芯片的表达谱分析结果，选择了一个油菜差异表 达基因，其对应的拟南芥同源基因为At3G51300(AtROP1)，采用荧光定量PCR方法，对油菜中该基因(BnROP1)在 根、茎、叶、花 、雌蕊 、雄蕊、角果中的表达模式进行了分析，在此基础上构建了AtROP1基因的microRNA干扰载体， 通过农杆菌介导的拟南芥转化 ，获得 12株转基因苗。T，转基因植株大多出现角果数量减少或不结实、无花粉、花 药萎缩 以及小孢子数量大大减少的表型。对转基因T：多个株系的荧光定量PCR分析说明，目标基因的干扰是有 效的，靶基因的表达水平都显著下调。说明转基因植株的雄性不育表型和 ROP1基因的表达沉默有关，ROP1基因 不仅控制了花粉管的极性和伸长，还和小孢子的正常发育密切相关。 关键词：拟南芥；雄性不育；BnROPI；microRNA干扰 中图分类号：Q343．34 文献标识码：A 文章编号：1007—9084(2011)01—0001—08 SilencingofBnROP1homologuegeneleadstomalesterilityinArabidopsis ． WANG Zhuo—yu ，LIZhen—bo ，YANG Yong—xue ， HUANGJun—yan ，DONG Cai—hua ，LIUSheng—yl‘ (1．OilCropsResearchInstituteofChineseAcademyofAgriculturalSciences，KeyLaboratoryofOil CropsBiologyoftheMinistryofAgriculture，Wuhan430062，China；2．Collegeof Sciences， South—CentralUniversityforNationalities，Wuhan430074，China) Abstract：BasedonpreviousanalysisofmicroarrayexpressiononBrassicanapushomozygouspairsofdomi- nantmalesterileline，adifferentiallyexpressedBrasscianapusgene(BnROP1)whichishomologoustoAt3G51300 (AtROP1)wasselected．MethodoffluorescentquantitativePCRwasusedtoanalyzetheexpressionpatternofBn． ROP1indifferenttissuesofB．napus，includingroot，stem，leaves，flower，pistil，stamenandsilique．Theresults indicatedthatBnROP1washighlyexpressed infertileflowerand stamen．On thisbasis，microRNA interfere