第三章紫外可见分光光度法.ppt

例1 邻二氮菲光度法测铁  ?(Fe)=1.0mg/L, b=2cm , A=0.38  计算? 和 解： c(Fe)=1.0 mg/L=1.0×10-3/55.85 =1.8×10-5mol/L ?A = A?1a+b – A?2a+b = (A?1a + A?1b )– (A?2a+ A?2b) = A?1a – A?2a = κ?1a CXL – κ?2a CXL E F A λ λ1测 λ2 参 a b 四、示差分光光度法 普通的分光光度法采用不含被测组分的参比溶液，而示差分光光度法则使用一定浓度的被测物作参比溶液。 普通 参比 T→100% 示差 参比Cs As=κsCsL T→100% 未知液 Ax=κxCxL ΔA=As－Ax=κ(Cs － Cx)L= κ?C L 1. 单标准示差分光光度法 应用于高浓度，低浓度样品的测量 （1）高浓度溶液 CxCs 高吸光度示差法是用浓度比试样溶液稍低的标准溶液用作参比溶液来调节 T=100% 。 普通的分光光度法：测得试样的T=5.0%, 配制一浓度稍低的标准溶液Cs,测得T=10.0%, 二者之差为5% 示差法: 用标准溶液Cs 来调节仪器令T=100%, 再测定试样Cx, 可得T=50.0%, 二者之差为50%。示差法相当于把标尺扩大了10倍，测量读数的相对误差也就缩小了10倍。 示差分光光度法(示差法)与普通光度法的关系 示差法: 采用浓度稍低于试样的标准溶液(Cs)作参比溶液调节仪器T→100％(A=0)，再测定试样溶液的吸光度(称为相对吸光度)，相对应的透光度称为相对透光度。 普通光度法:以纯溶剂或空白试剂作参比溶液，测得标准溶液及试液的吸光度分别为As和Ax，对应的透光度为Ts和Tx， 普通光度法与示差法的关系 根据朗伯-比尔定律 普通光度法: As=κsCsL Ax=κxCxL 示差法: ΔA=As-Ax=κ(Cs-Cx)L= κ?C L 上式意义：在符合朗伯-比尔定律测定浓度范围内，示差法测得的相对吸光度(ΔA)与被测溶液和参比溶液的浓度差(Cs-Cx,即ΔC)成正比，即可用于定量测定。此时试液的ΔT＝50％，令读数落在适宜的范围内，提高了测定的准确度。 （2）低浓度溶液 CxCs 用Cs调T=0，再用纯溶剂调T=100%，测Cx的T或A 把原来的90%~100%一段扩展成0~100%，透光率扩大了10倍。被测物质的透光率由95%→50%。 2、双标准示差分光光度法 Cs1＞Cx﹥Cs2 用Cs1调T=0，Cs2调T=100%，测Cx的T或A Cx1 Cx2 小结： 3.3 紫外可见吸收光谱与分子结构的关系 3.4紫外可见分光光度计 3.1 概 述 3.5 应 用 3.2 基 本 理 论 含共轭结构的有机化合物 分 区 谱图；定性；定量 分子轨道理论 ?-?*；n-?*；?-?*；n-?* 几 个 概 念 定量分析 定性分析 判断异构体 了解有机化合物紫外、可见吸收光谱产生的基本原理； 掌握有机化合物中电子跃迁的基本类型。 掌握紫外—可见分光光度计的主要组成部件及各部件的要求。 教学要求 选择溶剂的原则 选择溶剂时注意下列几点： （1）溶剂应能很好地溶解被测试样，溶剂对溶质应该是惰性的。即所成溶液应具有良好的化学和光化学稳定性。 （2）在溶解度允许的范围内，尽量选择极性较小的溶剂。 （3）溶剂在样品的吸收光谱区应无明显吸收。 1，饱和烃及其取代衍生物 饱和烃类分子中只含有?键，因此只能产生???*跃迁，即?电子从成键轨道（ ? ）跃迁到反键轨道（ ? *）。饱和烃的最大吸收峰一般小于150nm，已超出紫外、可见分光光度计的测量范围。但是它们是测定紫外和（或）可见吸收光谱的良好溶剂。 不同类型化合物的特征吸收 2，不饱和烃及共轭烯烃 在不饱和烃类分子中，除含有?键外，还含有?键，它们可以产生???*和???*两种跃迁。 ???*跃迁的能量小于 ???*跃迁。 实例： H2C=CH2 ?-?* λmax = 171nm