高山红景天对过氧化氢所致人内皮细胞损伤的保护作用研究-天然药物化学专业论文.docxVIP

望±型墼查竺旦鳖墨兰堕——————————————立型兰!!!!选缩略语 望±型墼查竺旦鳖墨兰堕——————————————立型兰!!!!选 缩略语 内皮细胞Endothelial Cell EC 四唑盐3一(4，5-dimethyltbiazol一2一01)2，5-diphenyl tetrazolium bromide MTT 乳酸脱氢酶Lactate—dehydrogenase LDH 人脐静脉内皮细胞Human umbilical vein endothelial cells HUVECs 高山红景天总苷Tota!Glucoside from Rhodiola sachalinensis A．Bor TGRS 红景天苷Sal idroside Sal 超氧化物歧化酶Superoxide dismutase SOD 过氧化氢酶Catalase CAT 磷脂酶Phosphol ipase PL 2 丝±型茎查堂旦堕垦堂堕——————————j生兰型!!垒兰高山红景天对H20。所致人内皮细胞损伤的保护作用研究 丝±型茎查堂旦堕垦堂堕——————————j生兰型!!垒兰 高山红景天对H20。所致人内皮细胞损伤的保护作用研究 学位申请人： 龚时薇 导 师： 吴继洲教授 中文摘要 为探索高山红景天对血管内皮细胞的作用，本文从高山红景天提取物的制 备、提取物对H20。处理的人内皮细胞存活率、代谢率、乳酸脱氢酶的影响及对 H202处理的人内皮细胞胞浆游离钙水平的影响几个方面，在细胞水平上研究了 高山红景天提取物对H202处理的入内皮细胞的影响，并初步探讨了其保护机制。 l、高山红景天提取物的制备 本实验通过萃取、柱色谱等方法从高山红景天的根中提取得到的粉末性提取 物即高山红景天总苷(以下简称为总苷)。 2、高山红景天提取物对H20。处理的人内皮细胞存活率、代谢率、乳酸脱氢酶 的影响 目的探讨高山红景天提取物对H。02处理的人内皮细胞的影响。材料和方 法利用培养的人脐静脉内皮细胞，采用台盼蓝活细胞拒染实验、四唑盐(MTT) 比色法实验、乳酸脱氢酶(LDH)检测实验，观察了高山红景天提取物对H202处理 的人内皮细胞存活率、代谢率、培养液LDH的变化。f结果与空白对照组比较， H：oz的处理组蓝染细胞数量显著增加(PO．05)，细胞摄取MTT量明显降低 (P0．05)，细胞上清液LDH释放量明显增高(PO．05)；而与H20：处理组比较， Img·1～，5mg·一10 mg·11总苷预处理组均能显著减少H：02处理引起蓝染细胞 数量增加(PO．05)，显著增高MTT值(PO．05)，显著减低细胞上清液LDH释 放量(Po．05)。7结论、高山红景天提取物对H20：损伤的人脐静脉内皮细胞具 ／ 3 华中科技大学同济医学院 华中科技大学同济医学院 硕士学位论文 有显著保护作用一， 3、高山红景天提取物对H：O：处理的人内皮细胞胞浆游离钙水平的影响 目的：进一步探讨高山红景天对H：O：处理的人内皮细胞的保护机制。方法： 利用ca2+高选择性荧光探针Fura一21Am，通过荧光分光光度计法，研究了高山红 景天对H。如处理人内皮细胞胞浆游离钙水平的影响。f结果：正常人内皮细胞(空 白对照)胞内游离钙离子浓度为101．02±5．46 nmol·1～，H。02处理10分钟后， 胞内游离钙离子浓度大大升高，达348．13±26．99 nmol·1～：Img·1～．5 IIlg·l～，10 mg·11总苷预处理组，胞内游离钙离子浓度分别为185．89±25．95 nmol‘l～，172．78±17．57 nmol·l～，162．57±19．49 nmol·l～，明显低于单纯 H。02处理组(PO．01)；lOmg·11总苷预处理对照组胞内游离钙离子浓度为 98．87±6．97 nmol·1～，与空白对照组无明显差异(PO．05)矿结论：高山红景 天可有效减轻Hz如所致的人内皮细胞内钙超载程度，可能是其发挥细胞保护作 用的一个重要机制。 综上所述，高山红景天提取物对H：02损伤的人脐静脉内皮细胞具有显著保 护作用，其作用机理可能为有效减轻H。02所致的人内皮细胞内钙超载程度有 关。该研究为高山红景天作为细胞保护剂用于内皮细胞损伤相关疾病的治疗提 供