高强度聚焦超声治疗裸鼠皮下人胶质瘤的研究-外科学(神经外科)专业论文.docxVIP

重庆医科大学硕士研究生学位论文 重庆医科大学硕士研究生学位论文 高强度聚焦超声治疗裸鼠皮下人胶质瘤的研究 摘要 【目的】通过观察高强度聚焦超声(High Intensity Focused Ultrasound，HIFU)对裸鼠皮下人胶质瘤模型作用后的病理转归以及血 管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、增殖细胞 核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)蛋白的表达和细胞凋亡 的检测，探讨HIFU治疗胶质瘤的有效性和安全性。 【方法】建立24只裸鼠皮下人胶质瘤模型，随机分为对照组和实 验组，用频率9．7MHz，焦距4．5mm，声强2500W／cm2的HIFU连续作 用20s。实验分为两部分，在第一部分中，观察HIFU作用后急性期 (≤3d)、亚急性期(钆14d)、慢性期(15-30d)各组裸鼠肿瘤的生长情况， 行2，3，5-三苯基氯化四氮唑(triphenyl tetrazolium choloride，TTC) 染色、常规组织学切片HE染色及电镜检查；在第二部分中，取第一部 分照射组的肿瘤组织，51a m组织连续切片，采用免疫组织化学染色法 检测HIFU作用后第7d、14d、30d照射区、交界区、正常区VEGF、 PCNA蛋白的表达；应用原位末端标记法(TdT．mediated dUTP nick end labeling，TUNEL)检测照射区、交界区、正常区的凋亡细胞。 【结果】24只裸鼠全部成瘤，接种20d后肿瘤体积为 (1 66．56+9．23)mm3，在HIFU作用7d后，实验组肿瘤体积及肿瘤体积 倍增时间(tumor volume doubling time，TD)与对照组比较，差异有统 2 重庆医科大学硕士研究生学位论文计学意义(尸O．05)。TTC染色显示胶质瘤的生物学焦域为(66．1 重庆医科大学硕士研究生学位论文 计学意义(尸O．05)。TTC染色显示胶质瘤的生物学焦域为(66．1 2+2．52) mm3。HE染色示，照射区即刻就发生凝固性坏死，并随观察时间的延 长坏死越明显，在亚急性期和慢性期可以观察到明显的交界区形成， 且在照射区、交界区之间形成锐利的边界。电镜示，照射区细胞超微 结构出现典型的凝固性坏死改变。免疫组化观察到，第7d时照射区、 交界区及正常区均有VEGF表达，照射区VEGF阳性细胞百分数低于 交界区，交界区VEGF阳性细胞百分数低于正常区，两两比较差异有 统计学意义(pO．05)；14d、30d时仅有交界区和正常区表达VEGF，交 界区VEGF阳性细胞百分数低于正常区，两者比较差异有统计学意义 (pO．05)。各时刻点照射区均无PCNA蛋白的表达及未检测到凋亡染色 阳性的细胞；各时刻点交界区的PCNA标记指数(PCNA labeling index， PCNA LI)低于正常区而凋亡指数(apoptotic index，AI)高于正常区， 与正常区比较差异均有统计学意义(pO．05)。 【结论】在本试验设定参数及声学剂量情况下，HIFU不仅能够准 确、完全杀灭照射区胶质瘤细胞，还能有效抑制交界区胶质瘤细胞增 殖，降低其恶性程度。HIFU有望成为治疗胶质瘤的新途径。 关键词：胶质瘤，高强度聚焦超声，有效性，交界区 3 重庆医科大学硕士研究生学位论文THE 重庆医科大学硕士研究生学位论文 THE STUDY ON TREATMENT oF SUBCUTANEoUS HUMAN NEURoGLIoCYToMA oF NUDE MICE BY HIGH INTENSITY FOCUSED ULTRASOUND(HIFU) ABSTRACT objective：To explore the validity and safety of High Intensity Focused Ultrasound(I-nFU)in therapy for neurogliocytoma by observing pathological regression，the expression of vascular endothelial growth factor and proliferating cell nuclear antigen and the result of·apoptosis cell detection in subcutaneous human neurogliocytoma of nude mice after ablation． Meth ods：This study includede two parts．In the first part，subcutane