高度羧基化聚乙烯醇超细纤维膜的制备及其蛋白质吸附性能研究-纺织材料与纺织品设计专业论文.docxVIP

万方数据 东华大学 王晓亮硕士学位论文答辩委员会成员名单 姓名职称职务工作单位备注于伟东教授答辩委员会主席东华大学吴德群副教授答辩委员会委员东华大学刘洪玲副教授答辩委员会委员东华大学纪峰副教授答辩委员会委员东华大学吴雄英研究员答辩委员会委员上海出入境检验检疫局张弘楠讲师答辩委员会秘书东华大学东华大学硕士学位论文 摘要 高度羧基化聚乙烯醇超细纤维膜的制备及其蛋白质 吸附性能研究 摘 要 高纯度蛋白质在免疫诊断学、免疫疗法和生物科学研究等领域具 有广阔的应用，因而制备具有快速、高效蛋白质吸附性能的材料已成 为生物科技领域一个十分重要的研究课题。在蛋白质分离纯化技术中， 离子交换层析技术是最有效的分离手段之一，也是很重要的蛋白质纯 化方法。采用这种方法分离纯化蛋白质具有很多优点，如分离效率高、 操作简单、适用范围广、有利于规模化生产、蛋白质不易失活等。 本文通过以聚乙烯醇（Poly(vinyl alcohol), PVA）和顺丁烯二酸酐 （Maleic anhydride, MAH）为原料，将静电纺丝技术和原位接枝聚合 相结合的方法制备了具有良好蛋白质吸附性能的超细纤维膜。静电纺 丝技术可以制备出具有超细纤维尺度和较大比表面积的高分子聚合 物纤维膜，通过调控纺丝工艺参数可以很好地控制纤维膜的孔结构， 为蛋白吸附提供了良好的前提；原位接枝聚合技术通过对PVA高分子 聚合物表面进行改性处理，拓宽了超细纤维膜的应用领域。 通过本课题的研究，我们成功制备了具有较大比表面积、较高孔 隙率、三维曲孔连通结构和良好机械性能的PVA/MAH超细纤维膜， 同时其表面具有丰富的羧酸基团，因而可实现对带正电蛋白质的特异 性吸附。经过实验探究发现，MAH的含量是影响合成PVA/MAH超细 纤维膜吸附性能的关键性因素，通过对不同MAH含量的PVA/MAH超 I  细纤维膜进行吸附性能测试，结果发现当MAH与PVA的摩尔比为 30%，吸附性能达到最佳，对溶菌酶的最大吸附量达到177mg/g；而通 过探究吸附时间对吸附性能的影响，发现其吸附平衡时间仅为4小时； 对PVA/MAH超细纤维膜进行10次循环吸附性能测试，结果表明其重 复使用性能良好。此外，仅在重力产生的相对较小压降（750Pa）下， PVA/MAH超细纤维膜对溶菌酶的饱和动态吸附量可达159mg/g；通 过对溶菌酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、牛血清蛋白、卵清蛋白和胃 蛋白酶的混合蛋白溶液进行吸附实验，并结合十二烷基硫酸钠聚丙烯 酰胺凝胶电泳分析，验证了PVA/MAH超细纤维膜在捕获蛋白的过程 中具有选择性。 本课题 基于 超细 纤 维 膜 的 高 比 表 面 积 和 高 孔 隙 率 ， 制备的 PVA/MAH超细纤维膜对溶菌酶的吸附性能较平滑膜材料和商业蛋白 质吸附材料有大幅提升，因而有望作为一种高性能纤维基蛋白质吸附 材料用于带正电蛋白质的纯化，具有良好的发展前景。 关键词：静电纺丝；PVA/MAH 超细纤维膜；羧基化改性；蛋白吸附 II  FABRICATION OF HIGHLY CARBOXYLATED POLY(VINYL ALCOHOL) ULTRAFINE FIBROUS MEMBRANES FOR EFFICIENT ADSORPTION OF PROTEINS ABSTRACT Highly purified proteins are critical for addressing issues in immunodiagnostics, immunotherapy, and scientific research, thereby, the current biotechnological and biopharmaceutical industries have made tremendous efforts towards the purification of proteins. Creating adsorptive materials for the fast, efficient, and high-throughput adsorption and purification of proteins is critical to meet the great demands for highly purified proteins, yet it has proven to be a highly challenging task. Among numerous protein purification technology, Chromatography is one of th