如何选择合适细胞培养基.PDFVIP

如何选择合适的细胞培养基？ 细胞培养是实验室里最常见和最基本的实验了，但却不是最简单的。别小看细胞培养，这里可 蕴含着大学问。有时候细胞状态不好，转染、药筛这些实验根本就没办法做。影响细胞培养的因素 很多，让我们先从培养基和血清说起。 经典的培养基有很多种，Invitrogen ◆ RPMI 1640 培养基是专为淋巴细胞培 （GIBCO）、Thermo Fisher （HyClone）、 养而设计的，现在已广泛应用于悬浮细胞的培 Sigma 等公司都可以提供。其中DMEM、 养。 RPMI 1640、MEM、DMEM/F12 都是应用最 以前经常听到有人问，这种细胞该用哪一 广泛的培养基。其他如M199、IMDM、L15 种培养基呢？其实这个问题的答案可以很简 培养基等也用于某些细胞的培养。 单，也可以好复杂。此话怎讲？如果这种细胞 ◆ MEM 是由Eagle’s 基础培养基（BME） 是购自ATCC 或其他的细胞库，那很简单， 发展而来的，其中增加了组分的范围及浓度。 问供应商就行了。或者找到相关的文献，作为 参考。Invitrogen 网站上有一个Cell Line ◆ Dulbecco 改良的BEM （DMEM）培 Database 的工具，也很好用。选择你感兴趣 养基是为小鼠成纤维细胞设计的，现在常用于 的细胞类型，它就会弹出推荐的培养基、血清 贴壁细胞的培养。DMEM 的氨基酸浓度是 和转染试剂等，有时还有优化好的转染步骤， MEM 的两倍，维生素浓度是MEM 的4 倍， 很方便。Sigma 网站上也有一个Media 采用双倍的HCO3-和CO2 浓度起到更好的 Expert，包括了培养基所有成分的功能描述、 缓冲作用。最初的配方中葡萄糖含量为1000 使用推介和参考文献等，它还是一个解决问题 mg/L，后来为了某些细胞的生长需要，将葡 能手，对于细胞培养中的常见问题，如细胞贴 萄糖含量又调整为4500 mg/L ，这就是大家常 壁不好、培养基变色等，它都会列出可能的原 说的低糖和高糖了。 因，并提供补救办法。这个Expert 果然不简 ◆ aMEM 含有附加的氨基酸、维生素以 单！ 及核苷和脂肪酸，它可广泛应用于各种细胞类 但如果你是着手建立一种全新细胞的培 型，包括对营养成分要求苛刻的细胞。 养体系，根本找不到任何参考，那你就得花点 ◆ Ham’s F12 是为在低血清浓度下克隆 时间自己试验了。万事开头难嘛。因为没有一 CHO 细胞而设计的，现在也广泛应用于克隆 个标准答案。在MEM 中培养的细胞，很可能 形成率的分析及原代培养。F12 还可以与 在DMEM 或M199 中同样很容易生长。总之， DMEM 等体积混合使用，得到一种高浓度与