dna修复酶活性检测的荧光生物传感方法研究-析化学专业毕业论文.docx

山东大学博士学位论文2．2．4聚丙烯酰胺凝胶电泳考察双链DNA探针的解离 山东大学博士学位论文 2．2．4聚丙烯酰胺凝胶电泳考察双链DNA探针的解离 46 2．2．5制备细胞裂解液 一46 2．3结果与讨论 ．．． ．47 2．3．1基于DNA机器的荧光信号扩增方法对UDG活性进行检测的设计 原理 47 2．3．2考察基于DNA机器的荧光信号扩增方法对UDG活性进行检测的 可行性 47 2．3．3优化反应条件 ．．48 2．3．4检测UDG的活性 ： 53 2．3．5考察特异性 ．．53 2．3．6考察精密度和重现性 ．．54 2．3．7检测细胞裂解液中的UDG活性 55 2．3．8检测UDG活性的抑制 55 2．4结论 ．56 参考文献 57 第三章粘性末端．介导的链置换反应结合荧光信号扩增方法用于尿嘧啶一DNA糖 基化酶活性的灵敏检测 ．．6l 3．1引言 ．61 3．2实验部分 62 3．2．1试剂和仪器 ．．62 3．2．2检测UDG的活性 63 3．2．3检测UDG活性的抑制 64 3．2．4细胞裂解液的制备 ．．64 3．3结果与讨论 65 3．3．1基于粘性末端一介导链置换的荧光信号扩增方法对UDG活性进行 检测的设计原理 65 3．3．2基于粘性末端．介导链置换的荧光信号扩增方法对UDG活性进行 检测的可行性验证 66 3．3．3优化反应条件 ．．67 万方数据 山东大学博士学位论文3．3．4检测UDG的活性 山东大学博士学位论文 3．3．4检测UDG的活性 70 3．3．5考察特异性 ．．72 3．3．6检测细胞裂解液中的UDG活性 72 3．3．7检测UDG活性的抑制 73 3．4结论 74 参考文献 75 第四章双识别发夹探针介导的荧光信号扩增方法用于灵敏检测尿嘧啶一DNA糖 基化酶和内切酶Ⅳ的活性 79 4．1引言 79 4．2实验部分 80 4．2．1试剂和仪器 ．．80 4．2．2检测UDG的活性 81 4．2．3检测Endo IV的活性 ．．82 4．2．4琼脂糖凝胶电泳实验 一82 4．2．5细胞裂解液的制备 ．．83 4．3结果与讨论 83 4．3．1双识别发夹探针介导的荧光信号扩增方法用于灵敏检测UDG和 Endo IV活性的设计原理 ．83 4．3．2考察双识别发夹探针介导的荧光信号扩增方法用于灵敏检测UDG 活性的可行性 ． 84 4．33优化双识别发夹探针介导的荧光信号扩增方法用于检测UDG活性 的反应条件 85 4．3．4考察双识别发夹探针介导的荧光信号扩增方法用于检测UDG活性 的传感性能 ． 88 4．3．5考察双识别发夹探针介导的荧光信号扩增方法用于检测Endo IV 活性的传感性能 92 4．4结论 97 参考文献 98 第五章连接酶反应．介导的荧光信号扩增方法用于高效检测尿嘧啶．DNA糖基化 万方数据 山东大学博士学位论文酶的活性 山东大学博士学位论文 酶的活性 103 5．1引言 ．103 5．2实验部分 104 5．2．1试剂和仪器 104 5．2．2检测UDG的活性 ．105 5．3结果与讨论 ．．． 106 5．3．1连接酶反应．介导的荧光信号扩增方法用于检测UDG活性的设计原 理 106 5．3．2连接酶反应一介导的荧光信号扩增方法用于检测UDG活性的可行 性验证 一107 5．4结论 一108 参考文献 ．109 第六章结论与展望 ．．113 6．1结论 ～“3 6．2展望 一1 14 致谢 ．．115 博士期间发表论文■l ：一： ： 1 17 万方数据 山东大学搏士学位论文CoNTENTS 山东大学搏士学位论文 CoNTENTS Abstract(in Chinese)．．．．．．．．．．．．． ．．．．．．．．．．．．．． ． ．．．．．．．．．． ． ．．．．．．．．．． ．．．．．．． ．．．．．．．．．．．．I Abstract(in English)．． ．．．．． ．．．．． ．．．．．． ．．．．．．．． ．．．．．． ．． ．．．．． ．．．．．．． ．V Symbol andAbbreviation．． ． ．．．．．． ． ．．．．． ．．．．．．．． ．．．．．．．．．．．． ． ．．．． ．．．． ．．．IX Chapter 1．Preface ．． ．．．．． ．．．． ． ．．．．．．．．． ．．．．．．．．．．．．． ． ． ． ，．．．．．．．． 1 1．1 Summarization ofDNArepair enzymes． ．．．． ．．．．．．． ．．．