miR审审23在小鼠骼肌中的表达及其对骨骼再生调节作用的初步研究.docxVIP

中文摘要中文摘要 中文摘要 中文摘要 脊椎动物骨骼肌组织的发育从胚胎期的肌祖先细胞开始，经历肌肉干细胞、 成肌细胞等中间细胞直至肌管形成和肌纤维成熟等一系列过程。在此过程中受到 多种生长因子及特征性转录调节因子的调控。最近的研究发现，肌肉的发育还受 到一类非编码小RNA，即MicroRN触(IIliRNAs)的调节，使肌肉发育分化的调 节过程更为复杂、更为精细。 血croRNA是一类长度为20．22个核苷酸的单链RNA分子，通过其种子序 列与靶基因n1】附A3’．非翻译区(3’．UTR)序列结合，进而在转录后水平调节 靶基因的表达。本文通过生物信息学分析发现：骨骼肌快肌的主要结构功能蛋白 基因，肌球蛋白重链基因Myhl、Myh2、Myh4 rnJ斛A的3’．∽限区均含有一个 保守的nliR-23结合序列。m诹．-23包括2种亚型：m淑．23a和miR-23b。二者相 差一个核苷酸，由不同基因编码。本文分析了miR．23在骨骼肌中的表达特征， 并初步研究了111iR．23a在小鼠体内对于骨骼肌再生的调节作用，研究结果如下： 一、应用re甜．the RT-PCR研究了ⅡliR-23在小鼠体内不同时期的表达水平， 结果发现血R．23在骨骼肌中表达水平较高。而在成体骨骼肌慢肌中表达水平明 显高于快肌；在小鼠胚胎期四肢骨骼肌中的表达水平低于成体骨骼肌。 二、应用real．血∞R]r．PCR研究了miR_23在C2C12细胞中的表达。C2C12 细胞是小鼠成肌细胞，体外可诱导分化为骨骼肌细胞。本文发现，在分化起始时， 细胞中有较低水平的m诹一23表达，随着分化的进行nliR-23表达水平降低。当 肌分化结束后，mi】023的表达维持在高水平。由此提示m诹．23表达水平与细胞 的肌分化过程具有一定的负相关性。 三、研究了miR一23a对于小鼠肌肉的调节作用。本文用盐酸布比卡因破坏 成体小鼠股四头肌，观察了m双．23a对于再生肌肉的作用。初步结果发现：再生 骨骼肌中Myhl和Myh2基因编码蛋白表达减少，而其mRNA表达水平没有降 低，说明miR．23a在翻译水平影响了基因的表达。 综上所述，本文发现，m诹．23在小鼠骨骼肌分化发育过程中表达水平发生 变化，可在翻译水平抑制快肌肌球蛋白重链的表达。本文的研究结果提示， InjcroRNA在肌肉分化发育过程中，可通过影响肌肉结构蛋白表达水平来调节肌 肉的发育。 关键词：rnjR．23 肌球蛋白重链 肌肉分化 AbstractAbstract Abstract Abstract The development of vertebrate skeletal muscle tissues begins丘om锄b巧。越c muscle progeIlitor cells ar】【d men muScle stem cells， myoblasts until myotube fom眦ion aIld muscle fiber maturi够Numerous genes，includiIlg grow出f-actors alld traIlscription factors haVe been identified t0 p硎cipate in mis process．Recently， n缸crof斟As(miRNAs)are r印orted to finely reguIate the deVelopment of skeletaJ muscle，ttlis made muscle deVelopmem more complex aIld sophisticated． microRNAs are 20—22 nucleotides long and inhib“translation or promote mRNA degmdation by annealing to complementary sequences in me 3’眦tr叽slated region of specific target删As．We found tllrough bioinformatics nlat mere are pairiIlg sequences of t11e seed sequence of miRNA一23 in the 3’-UTR丘agmentS of也e IIl】ⅢAs of tIle tllree myosin heavy ch2Lin gene(Myhl，Myh2 and Myh4)．MiR-23 have t、Ⅳ0 sub奶甲es，enCodiIlgby di虢rent genes，they are“R一23a a11d miR-23b aIld haVe orle mIcleo