泥蚶乙二醛酶基因的克隆及时空表达特征分析-水产学报.PDFVIP

第 卷第 期 水 产 学 报 年 月 文章编号 泥蚶乙二醛酶 基因的克隆及时空表达特征分析 姚韩韩 董迎辉 姚彬彬 包永波 林志华 浙江万里学院浙江省水产种质资源高效利用技术研究重点实验室浙江 宁波 摘要 为探索贝类乙二醛酶 基因的结构及功能特征实验利用 技术首次克隆获得泥蚶乙 二醛 基因 的全长序列并对其氨基酸序列特征及时空表达特征进行了研究 结果发现基因的全长序列为 开放阅读框为 编码 个氨基 酸在 处具有典型的乙二醛酶系保守序列成熟的乙二醛酶 由 个相同的亚基组成 每个亚基由乙二醛 基因编码其二级结构由 个 螺旋 个 折叠片和 个转角组成每个 亚基各含 个 氨基酸序列比对发现氨基酸序列与太平洋牡蛎的同源性达到 与其他脊椎动物的同源性也都在 以上表现出高度保守性 结果显示 基因在泥蚶成贝 个组织中均有表达在内脏团中的表达量最高极显著地高于其他组 织 在各发育时期中表达量随发育进程呈逐渐升高的趋势在眼点幼虫期 达到最高极显著高于其他时期 而在幼虫变态至稚贝时表达量又极显著地下降 研究表明具有类似于高等动物的分子结构并在泥蚶不同组织不同发 育时期表达差异显著这为进一步研究该酶在贝类中的功能和作用机制奠定了重要基础 关键词 泥蚶 乙二醛酶 基因 基因克隆 时空表达 荧光定量 中图分类号 文献标志码 酮基醛类物质如乙二醛 甲基乙二醛 泥蚶 是我国四大海水养 等是体内糖酵解脂质过氧化等多个代谢途 殖贝类之一具有较高的经济价值和产业发展前 径的产物是一类对细胞具有高度毒性的物质可 景开展其代谢生长调控机制等分子生物学研究 引起体 内细胞 和组织损伤 而 乙二醛酶 对开发利用泥蚶基因资源和发展健康养殖具有重 的天然活性底物为 酮基醛 要意义 本研究首次克隆得到泥蚶乙二醛酶 类物质能够将其转化为对细胞无害的 羟基酸 基因的 全长序列并对其序列 等物质在细胞中发挥着重要的解毒功能 另 特征组织表达及发育时期表达特征进行了分析 外乙二醛酶 通过催化 酮基醛类物质反应还对 为探索乙二醛酶 在贝类中的生物功能及作用机 细胞周期 细胞生长具有重要的调节功能 有 理研究奠定重要基础 关乙二醛酶 的基因结构酶活性及作用机理研究 材料与方法 已在高等动物中广泛展开其与炎症反应血管病 变等多种疾病的相关性分析也有一些报道 实验材料