新生鼠肺成纤维细胞原代培养方法的比较与体外肌成纤维细胞分化模型的建立.PDFVIP

27 2 J Med Postgra ，Vol． 27 ，No． 2 ，February ， 1·29 · 2014 2 第 卷第 期 2014 医学研究生学报 年 月 论 著 ( 础研究) 基 新生鼠肺成纤维细胞原代培养方法的比较与体外肌成 纤维细胞分化模型的建立 ， ， ， ， ， ， ， ， 孙 月 徐 洪 徐丁洁 魏中秋 于婉莹 邓海静 薛新新 杜世璞 杨 方 ［ ］ (fibroblasts ，FB) ， - 摘要 目的 肌成纤维细胞 是器官纤维化形成过程中关键的靶细胞 以特异表达α 平滑肌肌动蛋白 (-smooth muscle actin ， -SMA) 。 FB α α 和细胞基质沉积为特征 文中比较胰蛋白酶消化法和组织贴壁法原代培养乳鼠肺 的优缺 ， FB 。 FB ， 点 并报道体外肌 分化模型的建立 方法 分别采用胰蛋白酶消化法和组织贴壁法原代培养乳鼠肺 倒置相差显微 ，MTT ， ， - 1 (transforming growth factor- 镜观察原代培养 法检测细胞增殖 免疫细胞化学染色法鉴定细胞来源 采用转化生长因子 β 1，TGF- 1) FB FB 。 FB ，2 β β 诱导 向肌 分化 结果 采用胰蛋白酶消化法和组织块贴壁法均可以成功原代培养鼠胚肺 种方法 、 ， 无论在形态 细胞增殖水平还是在细胞鉴定方面均无差异 但胰蛋白酶消化法在相同条件下能够快速获得较组织贴壁法更多 ， 2 FB 4 -SMA ， TGF- 1 FB 。 TGF- 1 ， 的细胞 且 种方法获得的 在 代之内均不表达 α 需经 β 诱导分化为肌 随 β 诱导时间的延长 -SMA 。 、 FB ，4 FB α