AT6001 人类乳腺癌21基因Taqman探针法检测试剂盒.docxVIP

公司地址：杭州市西湖区青蓝科创园C座3号楼6楼 联系电话：0571 PAGE2 / NUMPAGES4 人类乳腺癌21基因表达检测试剂盒 （Taqman探针法） AT6001-01/02/03使用说明书 【产品名称】 通用名称：人类乳腺癌21基因表达检测试剂盒 英文名称：Fluorescent quantitative PCR detection kit for the analysis of 21gene expression for human breast cancer 【包装规格】 12人份/盒（AT6001-01）；24人份/盒（AT6001-02）；48人份/盒（AT6001-03） 【预期用途】 本试剂盒用于检测乳腺癌患者肿瘤组织中21个基因的表达情况，计算复发风险评分（recurrence score，RS），以协助医生对激素受体阳性，腋窝淋巴结阴性或腋窝淋巴结转移灶≤2mm(2011NCCN中国版)的乳腺癌患者术后复发风险评估，并预测患者对他莫昔芬或他莫昔芬联合化疗的敏感性。这个21个基因包括16个肿瘤相关基因和5个参考基因，其中16个肿瘤相关基因包括：增殖相关基因（MKI67 （Ki-67）、STK6（STK15）、BIRC5 （Survivin）、CCNB1（CyclinB1）、MYBL2）；侵袭相关基因（MMP11 （Stromelysin3）、CTSL2（Cathepsin L2））；Her-2相关基因（GRB7、ERBB2 （Her-2））；激素相关基因（ESR1（ER）、PGR (PR)、Bcl-2、SCUBE2）；GSTM1；BAG1；CD68。而5 个参考基因则为ACTB (Beta-actin) 、GAPDH、RPLPO、GUSB、TFRC。 根据计算方法的研究显示，其中 “有利”基因 （雌激素受体ER组，GSTM1，BAG1）的高表达将导致一个较低的RS值，而“不利”基因（增殖组、Her-2组、侵袭组和CD68）的高表达将导致一个较高的RS值。用美国乳腺与肠道外科辅助治疗研究组（NSABP ）B-20的试验结果表明，RS18时为低度复发风险；18≤RS31时为中度复发风险；当RS≥31时，为高度复发风险（图1）。 同时研究显示，在不同治疗方案(内分泌治疗单药组与内分泌治疗+辅助化疗组)下，复发风险评分与乳腺癌十年复发率呈显著相关性（图2）。辅助化疗可降低十年复发风险。在高危人群（RS≥31）中，辅助化疗降低十年复发风险的概率即绝对有效率可达26%；在中低危组（RS≤30），这个数字通常小于10%（图3）。 图1 图2 图3 【检验原理】 本试剂盒基于实时荧光定量PCR平台，采用相对定量分析技术，检测乳腺癌肿瘤组织中21个基因的表达情况，其中包括16个肿瘤相关基因和5个内参基因。通过特异性引物扩增和特异性荧光探针识别的检测原理，检测样本的16个肿瘤相关基因及5个内参基因的扩增情况，得出21个基因的Ct值，然后根据复发风险评分（recurrence score，RS）的算法，计算该样本的RS值，以评估复发风险和化疗效果。 【主要组成成份】 本试剂盒分为三个组份：第一个组份包含用于反转录反应的试剂；第二个组分包含用于定量的阴性对照和阳性对照，以及21支棕色离心管，这21支棕色离心管分别为21个基因的检测反应液，均由FAM信号指示，每支反应液内均含有引物和探针；第三个组份为定量试剂。（详见表1） 表1 试剂盒组分 编号 组分名称 试剂盒规格 说明 12人份/盒 (AT6001-01) 24人份/盒 (AT6001-02) 48人份/盒 (AT6001-03) 组份 一 1 Random Primer (100uM) 15μL 30μL 55μL 2 5×Reaction buffer 50μL 100μL 200μL 3 dNTP(10mM) 25μL 50μL 100μL 4 RNase Inhibitor 15μL 30μL 55μL 5 Reverse Transcriptase 15μL 30μL 55μL 组份 二 1 GRB7 PPM Mix 75μL 150μL 300μL 荧光信号：FAM，MGB 2 ERBB2 PPM Mix 75μL 150μL 300μL 荧光信号：FAM，MGB 3 ESR1 PPM Mix 75μL 150μL 300μL 荧光信号：FAM，MGB 4 PGR PPM Mix 75μL 150μL 300μL 荧光信号：F