基因表达谱芯片在肾脏移植免疫中的应用研究-外科学(泌尿外科)专业论文.docxVIP

缩略词表cDNA 缩略词表 cDNA Complem出t DNA 互补DNA HAR 珏gll acute蛹e甜on 超急性排斥反应 P1X Protdn-tyrosine kimse 蛋白酪氨酸激酶 LⅢ Loakemia㈣ory脚 白血病抑制因子 CKR Cyto幽e receptor 细胞因子受体 Hsp Heart shock protein 热休克蛋白 s^[Ⅺ Signal拄ansducertra嘶曲nand activator 信号传导和转录活化蛋白 CN calcinet血 神经钙蛋白 APC 抗原呈递细胞 PRA Panel reaction ofamibody 群体抗体反应 CTL 细胞毒性T淋巴细胞 NK Nmuralldll盯cell 自然杀伤细胞 ICE Ⅱ，18转化酶 CaM Calmodulin 钙调蛋白 CyP Cyclophilin 环孢素亲和素 AP-1 Activator protein 1 激活蛋白一1 簟=军医大掌博士掌位论文 簟=军医大掌博士掌位论文 基因寰达蕾甚片在膏雎移蕾免疫中的应用研究 月lj 吾 器官移植，包括肾脏移植已成为治疗终末期器官功能衰竭唯一有效的根治 方法。目前在移植界仍然面临许多难题，难题之一在于如何解决肾移植术后供 肾的长期存活。难题之二是肾移植超急性排斥反应(HAR)，它往往导致患者移 植失败。 许多学者认为组织配型程度相似，免疫抑制治疗方法相同的受者，临床结果却 不同，可能与多种免疫相关基因多态性有关。目前研究发现细胞因子及其受体、超 化因子及其受体、粘附分子等均具有基因多态性。许多基因多态性位于基因启动子 区，影响转录和翻译，并在一定程度上决定蛋白产物的表达水平。虽然组织配型和 免疫抑制疗法是器官移植成功的关键，但移植免疫相关基因的多态性可能对移植器 官的长期存活以及患者的个体化治疗=|锺要影响。 肾移植超急性排斥反应往往导致患者移植失败。那些容易发生超急性排斥 反应的患者通常被称为免疫高敏患者。免疫高敏的发生机制尚不明确。多数认 为与以下因素有关：①反复输血；②多次妊娠；③再次移植。每年有15％～ 20％的患者由于处于免疫高敏状态被排斥在移植的适应证之外。 无论是移植后的抗排斥免疫，还是移植前的免疫高敏，能否采用高通量、大规 模的基因芯片去筛选和发现移植免疫相关基因，找出它们的内在联系。为临床提供 理论依据和治疗方法。本实验的目的即在于此。 基因表达谱芯片在肾脏移植免疫中的应用研究 基因表达谱芯片在肾脏移植免疫中的应用研究 Study of gene expression proffie in renal transplant immunity by gene microarray 中文摘要 目的：研究和探索与肾脏移植免疫相关的差异表达基因。方法：选取肾移植术后4 —6周患者30例为移植术后组：选择PRA(群体抗体反圈85％的患者30例为免疫 高敏组；正常献血员为正常对照组，均采新鲜血液。用PVP自然沉降法提取白细胞， 标本均置于液氮罐保存。采用一步法提取总RNA，用荧光染料cy3．dkrrP标记正常 对照白细胞总RNA，用Cy5．dUTP分别标记移植术后组和免疫高敏组总RNA。逆 转录标记cDNA探针。采用高通量基因表达谱芯片(16，920点基因)进行芯片杂交， 并用ScanArray4000扫描仪扫描芯片，分别得到移植术后组和免疫高敏组的Cy3／Cy5 图像文件，通过划格确定杂交点范围， 过滤背景噪声，提取基因表达的荧光信号强 度值。ArrayPro Analyzer 4．0分析Cy3 和回5两种荧光信号的强度和比值×结果： 移植术后组基因差异性表达显示基因433条(2．55％)，上调基因26条，其中已知 基因11条，未知基因15条，下调基因407条，其中已知基因252条，未知基因155 条。免疫高敏组基因差异性表达显示基因877条(5．18％)，上调基因88条，其中 已知基因55条， 未知基因33条：下调基因789条，其中已知基因510条，未知基 因279弘：因条X结论： 运用高通量、大规模基因表达谱芯片分析和研究基因表达谱系， 能够有效筛选有关移植免疫方面的相关基因。 关键词：肾脏 移植免疫基因芯片基因 Study Study of gene expression profiles in renal transplant immunity by gene microarray Abstract Objective：To explore and discover the relate genes诵lh transplantal immunity． Method：By virtue of gene microarray t