第04章蛋白质化学.pptVIP

亚基之间的结合力主要是疏水作用，其次是氢键和离子键。 (六)蛋白质的四级结构 (quarternary structure) 蛋白质分子中各亚基的空间排布及亚基接触部位的布局和相互作用，称为蛋白质的四级结构。 有些蛋白质分子含有二条或多条多肽链，每一条多肽链都有完整的三级结构，称为蛋白质的亚基 (subunit)。 血红蛋白的四级结构 三、蛋白质和多肽合成的基本原理 （一）化学合成法的基本原理 1.氨基酸的基团保护 选择条件：接肽缩合时起保护作用，接肽后易除去而不引起肽键的断裂。 氨基保护:常用苄氧羰酰氯(Cbz-CL)， 钠-液氨法除去 羧基保护:常用无水乙醇，碱水解 2.多肽的液相合成 (1)氨基酸的基团保护 (2)接肽缩合反应 常用N、N′-二环己基碳二亚胺（DCCI） (3)肽化合物的合成：去掉氨基保护，分离纯化 3.多肽的固相合成 优点：合成肽在固相载体上、 便于自动化、产物容易分离、通常 合成小分子肽 缺点：反应不完全、保护基脱落、肽和载 体断裂、纯度不如液相合成法高 （二）生物技术合成蛋白质 1.基因工程（genitic engineering) 又称DNA重组 转基因动物 、蛋白产量高 2.细胞工程（cell engineering) 杂交瘤细胞：干扰素、EPO 3.酶工程（enzyme engineering) 酶反应专一、效率高，可在常温、常压和水溶液中反应，易与有机合成密切结合 蛋白质结构与功能的关系 第 四 节 一、蛋白质一级结构与功能的关系 1.一级结构不同、生物学功能不同 2.一级结构中“关键”部位相同，其功能也相同 促肾上腺皮质激素(ACTH)和促黑激素(α-MSH, β-MSH)共有一段相同的氨基酸序列，因此，ACTH也可促进皮下黑色素生成但作用较弱。 3.一级结构“关键”部位的变化，其生物活性改变 例：镰刀形红细胞贫血 N-val · his · leu · thr · pro · glu · glu · · · · ·C(146) HbS β 肽链 HbA β 肽 链 N-val · his · leu · thr · pro · val · glu · · · · ·C(146) 这种由蛋白质分子发生变异所导致的疾病，称为“分子病”。 4.一级结构的变化与疾病的关系 糖尿病胰岛素分子病是胰岛素51个氨基酸中仅有一氨基酸残基异常。 …… 亮 1.蛋白质前体的活化 二、蛋白质空间结构与功能的关系 赖 缬 天 天 天 天 甘 异 赖 缬 天 天 天 天 缬 组 丝 S S S S 46 183 甘 异 缬 组 丝 S S S S 肠激酶 胰蛋白酶 活性中心 胰蛋白酶原的激活过程 一些蛋白质由于受某些因素的影响，其一级结构不变而空间构象发生一定的变化，导致其生物学功能的改变，称为蛋白质的变构效应。 2. 蛋白质的变构现象 3. 蛋白质构象改变与疾病 因蛋白质的折叠错误或折叠导致构象异常变化引起的疾病，称为蛋白质构象病。 朊病毒（PrP)所致的疯牛病就是蛋白质构象病的一种。 正常型 （PrPc ） 致病型（PrPsc ） （α-螺旋） （β-折叠） 三、蛋白质的结构与生物进化 第五节 蛋 白 质 的 性 质 一、蛋白质分子的大小，形状及分子量的测定 分子量的测定： 分子筛层析法又名凝胶过滤法 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 生物质谱法 二、蛋白质的变性 * 蛋白质的变性(denaturation) 在某些物理和化学因素作用下，其特定的空间构象被破坏，导致其理化性质改变和生物活性的丧失，称为蛋白质的变性。 1. 变性的本质 —— 破坏非共价键和二硫键，不改变蛋白质的一级结构。 3.变性的因素： 如加热、紫外线、乙醇等有机溶剂、强酸、强碱、重金属离子及生物碱试剂等 。 2.变性的特征 （1）生物学活性的丧失 （2）某些理化性质的改变 溶解度降低 结晶能力降低、黏度增加、 易被蛋白酶水解 若蛋白质变性程度较轻，去除变性因素后，蛋白质仍可恢复或部分恢复其原有的构象和功能，称为复性(renaturation) 。 天然状态，有催化活性 尿素、 β-巯基乙醇 去除尿素、 β-巯基乙醇 非折叠状态，无活性 4.变性作用的应用 临床医