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* 结核分枝杆菌(TB)是胞内感染病原体,侵入人体后发生体液免疫和T细胞为主的细胞免疫。 在细胞免疫过程中,抗原提呈细胞将结核菌加工成多肽,呈递給T细胞,T细胞受抗原多肽刺激,增殖分化为效应T细胞。 机体内被结核菌抗原致敏的效应T细胞,在体外受到结核特异性RD1抗原的刺激后,会分泌大量IFN- γ。通过IFN- γ的检测,可以精确的反映结核感染情况。 细胞因子的检测一般借助酶联免疫(ELISA)平台,万泰的TB-IGRA产品就采用的这种方法。另外还有酶联免疫斑点法(ELISPOT)和流式细胞术。ELISPOT是从单细胞水平上检测特异性T细胞,一个斑点代表一个细胞,通过斑点计数进行结果判定。流式细胞术对悬浮液流中单个细胞因子进行多参数定量分析,也可以用来判断细胞因子释放情况。 * 西安交通大学第二附属医院 * 四川宜宾第二人民医院 * 河北省胸科医院 * 肿瘤坏死因子TNF对于肉芽肿的形成和维持起到重要作用 TNF 抑制剂会使肉芽肿被破坏,细菌扩散,导致结核感染的几率显著上升; 英国和法国的研究均显示,抗TNF患者的结核发病率约为普通人群的10倍左右甚至更高; 如果对该类患者进行IGRA筛查并进行预防性治疗,可以有效降低结核病发病率。 * * * 欧洲疾病预防控制中心(ECDC) * TB-IGRA由万泰公司与厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心合作研制,历经6年,于2012年4月获得SFDA认证。 * 植物血凝素(Phytohaemagglutinin)是一种有丝分裂原,主要用于激活免疫细胞—淋巴细胞。是一种干扰素诱导剂,不仅可以刺激机体产生白介素-2和干扰素;还可以刺激机体产生非特异性抗体植物血凝素(PHA)自身无特异性,其进入机体后诱导产生干扰素等抗病毒因子发挥药理作用。PHA刺激T细胞增殖分化产生大量效应T细胞和细胞毒T细胞;效应T细胞分泌产生大量细胞因子(如干扰素等)杀伤病毒;细胞毒T细胞可直接杀伤病毒. ..PHA同时可刺激B细胞转化为浆母细胞然后增殖分化为浆细胞,浆细胞产生大量的非特异性抗体来中和病毒。 * 临床应用案例 肺结核辅助诊断: 某院呼吸科病人,男 临床症状:发热1周,咳嗽 检测结果:TB-IgG(-),TB-IGRA(+)T-N的值是21.5pg/ml 结果分析:TB-IgG灵敏度低,易漏检。 临床诊断:肺结核 备注:2011年,WHO建议不再使用结核抗体检测结核感染 临床应用案例 肺外结核辅助诊断: 某院感染科,女,75岁 临床症状:发热数日,胸痛,干咳 检测结果:X射线胸腔积液影像,积液涂片(-)、积液培养(-)、TB-IGRA T-N 350pg/ml,积液单核细胞增多,血沉快 结果分析:对于肺外结核的诊断,涂片与培养的阳性率极低,TB-IGRA(+),结合其他非特异辅助指标可明确诊断肺外结核。 临床诊断:结核性胸膜炎 临床应用案例 肺炎与肺结核的鉴别诊断: 某医院呼吸内科,男,59岁 临床症状:肺部有胸水,高烧发热,初步认定肺炎,抗生素治疗1周不见效果,高度怀疑结核。 检测结果:痰涂片(-),结核抗体(-),TB-IGRA(-) 结果分析:传统结核检测检出率在20%-40%,灵敏度低。IGRA检出率在90%以上,阴性排除意义高于涂片和抗体。患者继续用药3周,病情好转。 临床诊断:肺炎 * MTB与其他杆菌感染的鉴别诊断: 某院呼吸内科病人,男 临床症状:发热、咳嗽、咳痰、呼吸困难,乏力,多汗,关节疼痛 检测结果:痰涂片(-),菌培(-),肺部X射线可见肺结节,胸腔积液 诊断过程:该院诊断为结核但治疗无好转,患者转院检测IGRAs(-),试管凝集实验++,布病抗体++,确诊布氏杆菌感染,与该院打官司胜诉。 结果分析:由于痰涂片和菌培检出率低,阴性也未能引起重视,只凭X片和症状诊断为结核并治疗。治疗无效后,病人转院,检测IGRAs阴性,考虑排除结核,且病人为牧民,确诊布氏杆菌病。官司败诉后,该院才开始重视IGRAs检测。 最终确诊:布氏杆菌病 临床应用案例 MTB与NTM的鉴别诊断: 某院感染科病人,男 临床症状:发热1周,咳嗽,少量痰 检测结果:两次痰涂片(+),两次TB-IGRA(-),肺部X射线无异常,后经菌培鉴定为菌培(-) 结果分析:痰涂片不能区分非结核分枝杆菌,造成假阳性,而TB-IGRA与菌培结果相符,对结核分枝杆菌有很好的特异性。 临床诊断:鸟型分枝杆菌感染 临床应用案例 NTM(非结核分枝杆菌)比例增高 2000 年全国流调分离的抗酸杆菌菌株中,NTM 菌株占11. 1% ,其中90% 为非结核分枝杆菌肺病。 NTM 肺病的临床表现与结核病相似, 既可有全身中毒症状,亦有局部损害表现。但症状和体征缺乏特异性,20%-50% 的病人无明显症状,除非做菌
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