2018_2019学年高中生物克隆技术第6课时动物的克隆(Ⅱ)课件浙科版.pptxVIP

知识内容要求考情解读动物的克隆a1.简述动物的细胞融合技术及应用。2.描述动物细胞全能性的表现程度，说出动物难以克隆的原因。3.简述动物细胞核移植的概念和程序。4.列举动物细胞培养与动物细胞核移植的应用和发展前景。内容索引一、动物的细胞融合技术及其应用二、动物的克隆繁殖达标检测一、动物的细胞融合技术及其应用1.细胞融合与细胞杂交(1)细胞融合①含义：指 融合成一个细胞的现象。②促融方法：灭活的 、 介导、电融合技术等，其中 是效率很高的新型细胞融合技术。(2)细胞杂交①概念： 的细胞间的融合。②应用：细胞杂交中 容易丢失，利用杂交细胞检测特定_________ 与特定基因产物(蛋白质)减少的对应关系可进行 。两个或多个细胞仙台病毒聚乙二醇电融合技术基因型不同染色体丢染色体基因定位失新知导学2.单克隆抗体的制备(1)过程B淋巴产生特定抗体的杂交细胞提取抗体细胞骨髓瘤细胞(2)杂交瘤细胞的特点： ，产生 。(3)单克隆抗体的优点：其识别抗原部位的专一性，比一般抗血清_____ ，原因是一般抗血清中的抗体是____________________________ 。(4)单克隆抗体的应用：单抗可作为 ，研究相应抗原蛋白的 、 及其 。无限增殖单克隆抗体优越得多一群识别不同抗原部位的抗体混合物特异探针细胞学分布功能结构助学巧记血清抗体与单克隆抗体比较项目分泌细胞特点生产单克隆抗体杂交瘤细胞特异性强、灵敏度高产量高，易纯化分离血清抗体各B淋巴细胞特异性差、灵敏度低产量低，分离困难探究1——理性思维下列是A细胞与B细胞融合杂交的过程图解。思考回答相关问题：概念指两个或多个动物细胞融合成一个细胞的现象，其中基因型不同的细胞间的融合就是__________原理________________细胞杂交细胞膜的流动性互动探究诱导融合的方法①物理、化学方法：聚乙二醇、电刺激等；②生物方法：___________过程描述膜融合→质融合→核融合融合成功的标志杂交细胞进行__________重组细胞的特点杂交细胞具有两个细胞的遗传信息，能表现两个亲本的性状应用检测特定染色体丢失与特定基因产物(蛋白质)减少的对应关系进行 ；制备___________灭活的病毒有丝分裂单克隆抗体基因的定位骨髓瘤探究2——图示解读下列是制备单抗的基本方法步骤。请完善右图并思考回答相关问题：1.制备单克隆抗体的关键思路是：(1)克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群；(2)将_________与骨髓瘤细胞融合，获得杂交瘤细胞。杂交细胞杂交瘤细胞B淋巴细胞体外培养2.用B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的原因是什么？答案　(1)每一个B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体；不同种类的B淋巴细胞分泌的抗体不同；(2)B淋巴细胞在体外培养时不能无限增殖，骨髓瘤细胞能够无限增殖。答案3.杂交瘤技术制备单克隆抗体的最大优点：可以从特异抗原成分比例极少的抗原混合物中获得 。4.制备单克隆抗体过程中的几种细胞的特点：(1)免疫的B淋巴细胞：能产生 ，但不能无限增殖。(2)骨髓瘤细胞：能 ，但不能产生抗体。(3)杂交瘤细胞：既能产生 ，又能在培养条件下进行 。单抗单一抗体无限增殖特定的抗体无限增殖5.单克隆抗体制备过程中有两次筛选，其目的分别是什么？答案　第一次筛选是在B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合之后，筛选出只有B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交细胞。第二次筛选需先在多孔培养皿上培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。答案6.获取单克隆抗体的场所：若在培养基中进行杂交瘤细胞培养，则从 中提取；若在小鼠或其他动物腹腔中培养，则从 中提取。培养液腹水例1　(2017·浙江选考联考)TOP2A蛋白在多种肿瘤细胞中大量表达，成为抗肿瘤的研究靶点，某科研单位制作了TOP2A蛋白的单克隆抗体。请回答：(1)利用基因工程制备TOP2A蛋白：TOP2A蛋白基因和质粒用______________________________处理并连接成重组质粒，然后导入经______处理的大肠杆菌，并将大肠杆菌接种到含氨苄青霉素的LB液体培养基中培养，经离心得到菌体，破碎提纯得到TOP2A蛋白。限制性核酸内切酶和DNA连接酶CaCl2解析　在基因工程中常用限制性核酸内切酶和DNA连接酶处理并连接目的基因和质粒。为提高重组质粒导入大肠杆菌的概率，常用CaCl2处理大肠杆菌，以增大大肠杆菌细胞壁的通透性。解析答案(2)TOP2A蛋白单克隆抗体的制备：将TOP2A蛋白反复多次注射到小鼠体内，使其发生__________，取经过免疫的小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞在__________(填物质名称)介导下发生细胞融合，形成杂交瘤细胞。并将各杂交瘤细胞单独分装培养，经筛选、_________后，获得能产生单一抗体