桑树病程相关蛋白基因mupr1c及其启动子的功能研究特种经济动物饲养专业论文.docxVIP

关于学位论文原创性和使用授权的声明本人所呈交的学位论文，是在导师指导下，独立进行科学研究所取 关于学位论文原创性和使用授权的声明 本人所呈交的学位论文，是在导师指导下，独立进行科学研究所取 得的成果。对在论文研究期间给予指导、帮助和做出重要贡献的个人或 集体，均在文中明确说明。本声明的法律责任由本人承担。 本人完全了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规定，同意 学校保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸质本和电子版，允 许论文被查阅和借阅。本人授权山东农业大学可以将本学位论文的全部 或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制 手段保存论文和汇编本学位论文，同时授权中国科学技术信息研究所将 本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并向社会公众提供信 息服务。 保密论文在解密后应遵守此规定。 论文作者签名：超氇瑶导师签名：撇 日 期：趁医6．jZ 万方数据 符号说明Amp：Ampicillin，氨苄青霉素 符号说明 Amp：Ampicillin，氨苄青霉素 As：Acetosyringone，乙酰丁香酮 BLAST：Basic local alignment search tool，基本局部比对查询工具 bp：Base pair,碱基对 CaMV35S：35S promoter ofcaliflower mosoic virus，花椰菜花椰病毒35S启动子 CTAB：Cetyl trimethylammol lonium bromide，十六烷基三乙基溴化铵 DAB：Diaminobezidine，3，3’．二氨基联苯胺 ddH20：Distilledant deionized water,重蒸水 dNTP：Deocyribonucleoside triphosphate，脱氧核糖核苷三磷酸 E coli：Escherichia coli，大肠杆菌 EB：Ethidium bromide，溴化乙锭 EDTA：Ethylene diaminetetracetic acid，乙二胺四乙酸 IPTG：Isopropykhio 13 D galactosid，异丙基一D-D一硫代半乳糖 Kan：Kanamycin，卡那霉素 LB：Luria．bertani medium，LB培养基 NCBI：National centre for biotechnology information，美国国立生物技术信息中心 NBT：Nitrotetrazolium Blue chloride，氯化硝基四氮唑蓝 Pst DC3000：Pseudomonas syringae pv．Tomato DC3000，丁香假单胞菌番茄致病变种 PCR：Polymerase chain reaction，聚合酶链式反应 pI：Isoelectric point，等电点 RFP：Rifampicin，利福平 Tris：Ttrishydryxymethy laminomethane，三羟甲基氨基甲烷 万方数据 目 目 录 中文摘要 I Abstract． ．． ． ． ． ． ． ．． ． ． ． ． ． ． ． ．． ． ． ． ． ． ． ．．III 1前言 ．．1 1．1植物病程相关蛋白PRs的研究进展 ．．1 1．1．1 PRs蛋白的发现及分类 l 1．1．2 PRs蛋白的结构与理化特性 2 1．1．3 PRs蛋白表达的调控 4 1．1．4 PRs蛋白的功能及作用机制 5 1．2本研究的目的和意义 ．9 2材料与方法 ．．10 2．1材料 10 2．1．1植物材料 10 2．1．2菌株和载体 10 2．1．3试剂 10 2．1．4 PCR引物 ．．10 2．2方法 1 l 2．2．1 MuPRlc基因的克隆 一l 1 2．2．1．1桑树叶片RNA的提取 11 2．2．1．2 cDNA的合成 ll 2．2．1．3 PCR扩增MuPRlc基因 ．．12 2．2．1．4 PCR产物纯化 ．．12 2．2．1．5目的片段与克隆载体的连接 ．．13 2．2．1．6大肠杆菌细胞的转化 ．．13 2．2．1．7阳性克隆质粒的鉴定 一13 2．2．1．8序列测定 ．13 2．2．2 MuPRlc基因的生物信息学分析 14 2．2．2．1 MuPRlc基因的核苷酸序列分析 14 2．2．2．2 MuPRlc基因编码蛋白的基本特性分析 ．14 2．2．3㈣Jc基因的生物学功能分析 14 万方数据 2．2．3．1 2．2．3．1 MuPRlc植物表达载体的构建 14 2．2．3．2农杆菌GV3101感受态细胞的制备及转化 15 2．2．3．3拟南芥的转化、筛选与鉴定 一16 2．2．3．4转基因植株中MuPRl c蛋白的