卤虫中phb1分子表达特征及其在线粒体及卵黄颗粒代谢中的功能研究分析细胞生物学专业论文.docxVIP

卤虫中PI璐1分子表达特征及其在线粒体及卵黄颗粒代谢中的功能研究 卤虫中PI璐1分子表达特征及其在线粒体及卵黄颗粒代谢中的 功能研究 ⑧ 论文储签名：瑙 将教师黼私 答辩委员会主席： 罗琛教授 浙江大学生命科学学院 委员1{童堕这麴援 逝江太堂生佥型堂堂院 委员2：陈军 教授 浙江大学生命科学学院 委员3：陈枢青教授 浙江大学药学院 委员4：戚建华研究员 浙江大学药学院 委员5：杨卫军教授 浙江大学生命科学学院 万方数据 一 一 ‘^ Examlng乙ommlttee(21aalrigerson： Professor Chen—Luo(Zhejiang University) Examing Committee Members： ．Professor Xiao-Bo Zhang(Zhejiang University)． ．Professor Chen Luo(Zhejiang University)． Professor Jun Chen(Zheiiang University)． 一 ● 』_● ‘ ．Profes sor Shu-Qing Chen(Zheiiang University)． ．Protessor Jian-Hua Qi(Zhejiang University)． ．Profes sor Wei-Jun Yang(Zheiiang University)． Date of oral defence： 』坠n垦!Q也，2Q!垒 万方数据 浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。 浙江大学研究生学位论文独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。 除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成 果，也不包含为获得浙江太堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同 工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。 学位论文作糍：计咩掷期嗍降()月17日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解浙江太堂有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文 的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权浙江太堂可以将学位论文的全部或 部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇 编学位论文。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名：叶许导师签名． 签字Et期： 年月 日 签字日期： 年月 Et 万方数据 目次致谢 目次 致谢 l 中文摘要 II 英文摘要 III 插图和附表清单 IV 缩略词和术语表 V 目次 第1章绪论 1．1研究背景 1 1．1．1卤虫概况 ， 1．1．2休眠卵发育过程中线粒体的成熟 3 1．1．3卤虫休眠卵发育过程中卵黄颗粒的降解 4 1．1．4 PHBl的结构 4 1．1．5 PHBl在线粒体中的功能 6 1．1．6 PHBl在细胞核中的功能 7 1．1．7 PHB 1与能量代谢调控的关系 7 1．1．8 PHBl与细胞分化的关系 7 1．1．9 PHB 1在Ras．Raf-MEK信号通路中的作用 8 1．1．10 PHBl与疾病的关系 9 1．1．1l展望 9 1．2研究目的，方法和意义 加 第2章PHBl在卤虫胚胎发育过程中的表达及调控 U 2．1引言 n 2．2材料 坦 2．2．1实验材料 屹 万方数据 2．2．2主要试剂 2．2．2主要试剂 12 2．2．3主要仪器 12 2．3方法 13 2．3．1总RNA提取及cDNA合成 13 2．3．2 PHBl的克隆 2．3．3氨基酸序列比对及进化分析 2．3．4 Northern Blotting—— 2．3．5 Western Blotting 2．3．6细胞核抽提 22 2．3．7免疫荧光 23 2．3．8原核表达及蛋白质纯化 23 2．3．9样品包埋石蜡切片及处理 2．4结果 2．4．1 ArPHB 1的序列分析 2．4．2 ArPHB 1 mRNA在休眠卵发育过程中的表达 29 2．4．3 ArPHBl蛋白及其磷酸化在休眠卵发育过程中的变化 2．4．4 ArPHB 1的细胞核定位变化 32 2．4．5 ArPHB 1主要分布在线粒体中 33 2．5小结与讨论 第3章PHBl在卤虫休眠卵发育中的功能分析 35 3．1引言 35 3．2材料 36 3．2．1实验材料 36 3．2．2主要试剂 36 3．2．3主要仪器 37 3．3方法 37 3．3．1双链RNA的制备 37 3．3．2卤虫的显微注射 39 万方数据 3．3．3干涉效率检测3．3．4免疫沉淀 3．3．3干涉效率检测 3．3．4免疫沉淀 3