农杆菌活体转化技术的优化与高抗草甘膦棉种质的创制作物学专业论文.docxVIP

浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。 浙江大学研究生学位论文独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。 除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成 果，也不包含为获得逝婆太堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一 同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名：如诛 签字日期： 珈-l，年6月卵日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解逝婆太堂有权保留并向国家有关部门或机构送交本 论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权逝婆太茔可以将学位论文的 全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段 保存、汇编学位论文。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名：瓤凉 导师签名： 签字日期： Ⅻ·l，年 b月呷日 签字日期： 如Il，年b月·岬日 万方数据 致谢随着这篇论文的完成，也标志着我在浙江大学作物科学研究所学习生涯的结束。硕士 致谢 随着这篇论文的完成，也标志着我在浙江大学作物科学研究所学习生涯的结束。硕士 研究生的三年时光转瞬即逝，但此期间学到的知识、收获的情谊却注定会使我受益终身。 学习期间，学院老师的谆谆教诲不仅丰富了我的知识体系，更帮助我塑造了正直坚韧、质 朴踏实的人格，帮助我在不久的将来更好地适应社会、服务社会。时光荏苒，回忆往昔， 对于那些帮助我、激励我、引导我的人，我的心中充满了感激和不舍。 首先，要郑重感谢我的恩师祝水金教授在学习和生活中给予我的指导和关怀!祝老师 为人热情，治学严谨，待人真诚，对我的信任和关爱让我感动不已。从课题的选择到论文 的最终完成，老师始终给予我细心的指导和坚定的支持，虽肩负教学、科研重任，仍常常 询问我的研究进程，为我指点迷津，帮助我开拓思路，精心点拨、热忱鼓励，对我课题完 成、信心建立都帮助很大。感激、崇敬都不足以表达我对导师的感情，在这里谨祝福老师 身体康健，硕果累累，桃李天下! 其次，要感谢课题组陈进红老师!陈老师待我如同家人，日常学习生活中的点滴接触 都让人如沐春风、关怀备至，让人感念至深。同时也要感谢何秋伶师姐，她亦师亦友，常 与我们交流科研进展和生活经验!另外，也要感谢技术员马春凤和马陆强，感谢你们在大 田实验中的指导和协助!还要感谢祝师母、陈师母对我学习生活的关心和照顾! 感谢我的同窗蔡芸菲、余恩、辛文慧、董亚婷!三年来我们朝夕相处，共同进步，感 谢你们对我的关心、包容和帮助，希望我们在将来的工作岗位上都能实现自己的价值。感 谢师兄陈悦、李诚、孙英超、李威、梅磊、程鑫、陆智辉、肖钦之；师姐朱宁、潘晶晶、 刘伟、曹海燕、季灵艳、李书霞、阎君、李聪；师弟赵天伦、徐晓建、李佳乐、杨洋、邓 晓雷；师妹冯吉好、赵茹冰、刘慧、王汐妍、刘玉姣、张轶、张帆、胡佳惠，感谢Cotton Family这个大家庭，是你们让我的研究生生活丰富多彩，让我的实验没有那么艰难，也希 望你们科研顺利、天天开心! 我还要感谢我最亲爱的家人做我的坚强后盾，为我排忧解难；感谢好友周梦宁、王俞 璩等对我的帮助与陪伴，以及室友对我生活上的照顾! 最后，感谢本论文的隐名评审专家，感谢百忙中参与我论文答辩的各位老师! 黄洁琼 2016年3月于浙大紫金港 万方数据 摘要棉花是唯一可由种子生产纤维的农作物，棉花生产需要投入较多劳动力。由于劳动力 摘要 棉花是唯一可由种子生产纤维的农作物，棉花生产需要投入较多劳动力。由于劳动力 的转移，我国的人工价格不断上涨，植棉的比较效益和经济效益下降，导致近年我国棉花 生产的连年滑坡。我国的棉花生产仍以人工作业为主，其中棉田除草是植棉用工的主要内 容之一，占植棉用工的1／3以上。草甘膦(Glyphosate)是一种典型的广谱性、内吸传导 型灭生性除草剂，是杂草控制的首选除草剂。本研究将具有自主知识产权的抗草甘膦除草 剂基因(E PISPI孓G6)构建进植物表达载体，用农杆菌活体转化方法将目的基因转入陆地 棉推广品种中棉所49，创制高抗草甘膦棉花种质系，分析其抗性表现及相关农艺性状， 探讨其生产应用前景。主要研究结果如下： l、利用本实验室构建的表达载体pCAMBIAl300．EPSPS．G6，酶切获得目的基因 EPSPS-G6， 并与空载体pCAMBIA2301连接构建棉花高效表达载体 叫C川ⅥBIA2301．EPSPS．G6，去除原载体中的脚筛选标记基因，将目的基因作为筛 选标记。 2、对本实验室创制的农杆菌活体转化方法进行优化。结果表明，含50mg／L乙酰丁香 酮(acetosyringone，AS)的转化液可将阳性率